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三氧化二砷诱导心肌细胞凋亡对PKC-ε的影响
作者姓名:范玉华  杭鹏洲  杜智敏
作者单位:哈尔滨医科大学附属第二医院临床药学药物研究所,黑龙江省普通高校药物研究重点实验室,哈尔滨,150086
基金项目:国家自然科学基金项目(项目编号:30873065),国家自然科学基金重点项目(项目编号:81230081),创新团队项目(项目编号:81121003),
摘    要:目的探讨三氧化二砷诱导新生乳鼠心室肌细胞(NRVCs)凋亡过程中对PKC-ε的影响。方法 NRVCs随机分为6组:正常组(Ctrl)、三氧化二砷高、中、低剂量组(10、5、2μmol.L-1)、PKC-ε抑制剂(100 nmol.L-1)+三氧化二砷(5μmol.L-1)组、PKC-ε抑制剂(100 nmol.L-1)组。采用MTT法检测细胞活力,Hoechst 33342染色和TUNEL法检测细胞凋亡。应用Western blot技术检测PKC-ε蛋白表达水平。结果三氧化二砷(5、10μmol.L-1)孵育24 h剂量依赖性地降低NRVCs活力,诱导NRVCs凋亡。此外,三氧化二砷(5μmol.L-1)增加PKC-ε蛋白的表达。而抑制PKC-ε能够进一步促进三氧化二砷降低NRVCs活力,并加重NRVCs凋亡。结论三氧化二砷上调PKC-ε蛋白水平,而抑制PKC-ε促进三氧化二砷加重心肌细胞凋亡。本研究表明三氧化二砷能够引起PKC-ε表达异常改变,提示PKC-ε可能参与三氧化二砷诱导心肌细胞凋亡的病理过程。

关 键 词:三氧化二砷  PKC-ε  凋亡  PKC-ε抑制肽  心室肌细胞  Hoechst 33342  TUNEL
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