瘦素对人肾小管上皮细胞表型转化及纤维连接蛋白表达的影响 |
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引用本文: | 王楠楠,刘丽秋,仲伟营,孙元竹. 瘦素对人肾小管上皮细胞表型转化及纤维连接蛋白表达的影响[J]. 中国中西医结合肾病杂志, 2012, 13(4): 310-313,383 |
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作者姓名: | 王楠楠 刘丽秋 仲伟营 孙元竹 |
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作者单位: | 1. 青岛大学医学院附属医院肾内科,青岛,266003 2. 山东省邹城市郭里镇卫生院,邹城,273519 3. 山东省日照市人民医院血液净化科,日照,276800 |
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基金项目: | 山东省教育厅科技计划项目(No.J09LF55) |
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摘 要: | 目的:通过观察瘦素(leptin)刺激对人肾小管上皮细胞(HK-2)表型转化和纤维连接蛋白(FN)表达的影响,探讨瘦素对HK-2细胞转分化的作用。方法:将体外培养的HK-2细胞分为对照组和不同浓度瘦素作用组。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态学变化;实时荧光定量RT-PCR法检测HK-2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和FN mRNA的表达水平;免疫细胞化学法检测HK-2细胞表达α-SMA的阳性细胞百分数;酶联免疫吸附法(ELISA)检测HK-2细胞培养液上清中FN的表达。结果:分别用50、100、200 ng/ml瘦素作用HK-2细胞48 h后,(1)HK-2细胞逐渐由椭圆形变成长梭形,类似肌成纤维细胞的形态;(2)RT-PCR结果表明,瘦素作用可以下调E-cadherin mRNA的表达,同时上调α-SMA、FN mRNA的表达。(3)免疫细胞化学结果表明,对照组HK-2细胞几乎不表达α-SMA,随着瘦素作用浓度的增加,α-SMA阳性的HK-2细胞百分数逐渐增多;(4)ELISA结果表明,对照组HK-2细胞有基础水平的FN分泌,各瘦素作用组上清液中FN的表达水平较对照组显著增加,且呈一定的剂量依赖关系。结论:瘦素可诱导肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞,分泌细胞外基质,从而可能参与肾间质纤维化的发生发展。
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关 键 词: | 瘦素 肾小管 上皮细胞 上皮细胞-间充质转分化 纤维连接蛋白 |
Effect of Leptin on the Transdifferentiation and FN Expressionof Human Renal Tubular Epithelial Cell Line |
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Affiliation: | WANG Nannan,LIU Liqiu,ZHONG Weiying,et al Department of Nephrology,the Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College,Qingdao(266003) |
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Abstract: | |
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Keywords: | Leptin Kidney tubules Epithelial cells Epithelial mesenchymal transition Fibronectin |
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