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利用噬菌体展示技术制备人血管生成素2单链抗体
引用本文:张中林,艾勇彪,张吉发,袁玉蜂,刘志苏,何跃明. 利用噬菌体展示技术制备人血管生成素2单链抗体[J]. 中华实验外科杂志, 2012, 29(11)
作者姓名:张中林  艾勇彪  张吉发  袁玉蜂  刘志苏  何跃明
作者单位:1. 430071,武汉大学中南医院普通外科
2. 上海市奉贤区中心医院普外科
基金项目:中央高校基本科研业务费专项资金资助项目
摘    要:目的 用纯化的人血管生成素2(Ang2)蛋白,通过噬菌体展示技术从非免疫小鼠噬菌体展示抗体库中淘选、鉴定Ang2单链抗体.方法 以纯化的人Ang2蛋白为抗原,对非免疫小鼠噬菌体展示抗体库进行富集和筛选,获得Ang2单链抗体,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot法检测目的蛋白的表达并测序.结果 经过3轮富集和筛选,获得了1个能特异性识别Ang2蛋白的阳性噬菌体克隆,DNA测序表明其含有完整的单链抗体基因片段,大小约750 bp,表达蛋白相对分子质量约33.7×103;通过SDS-PAGE进一步实现Ang2单链抗体(phage-Ang2-scFv)的鉴定.结论 成功分离并鉴定人Ang2-scFv,为进一步的功能学研究奠定了基础.

关 键 词:血管生成素2  噬菌体抗体展示肽库  单链抗体

Generation of single-chain antibody against angiopoietin 2 by phage display peptide technique
ZHANG Zhong-lin , Ai Yong-biao , ZHANG Ji-fa , YUAN Yu-feng , LIU Zhi-su , HE Yue-ming. Generation of single-chain antibody against angiopoietin 2 by phage display peptide technique[J]. Chinese Journal of Experimental Surgery, 2012, 29(11)
Authors:ZHANG Zhong-lin    Ai Yong-biao    ZHANG Ji-fa    YUAN Yu-feng    LIU Zhi-su    HE Yue-ming
Abstract:
Keywords:Angiopoietin 2  Phage display peptide library  Single-chain antibody
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