| 肿瘤抗原基因MAGE-3的克隆、原核表达与纯化 |
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| 引用本文： | 马加海,隋延仿,叶菁,黄亚渝,陈广生,宋宏萍,张秀敏. 肿瘤抗原基因MAGE-3的克隆、原核表达与纯化[J]. 医学争鸣, 2004, 25(6): 485-488 |
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| 作者姓名： | 马加海 隋延仿 叶菁 黄亚渝 陈广生 宋宏萍 张秀敏 |
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| 作者单位： | 第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部病理学教研室,陕西,西安,710033 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，军队医药卫生科研项目 |
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| 摘 要： | ![]()
目的: 克隆人MAGE-3基因并进行原核表达和分离纯化. 方法: 通过RT-PCR从人黑色素瘤细胞株中扩增MAGE-3全长cDNA,经PCR扩增MAGE-3基因3′端324 bp片段,克隆入pGEX-4T-1载体,构建重组原核表达质粒pGEX/MAGE-3,对含有该质粒的大肠杆菌DH5α进行诱导表达和分离纯化.结果: 经RT-PCR扩增出大小约950 bp的基因片段,以此为模板经PCR扩增出约320 bp片段,测序结果与GenBank公布的MAGE-3序列一致,成功构建了pGEX/MAGE-3原核表达质粒,经IPTG诱导在大肠杆菌中表达Mr约42 000的GST融合蛋白,纯化的蛋白纯度为89%.结论: 成功克隆了人MAGE-3基因全长cDNA并对其3′端324 bp片段编码的108个氨基酸的蛋白进行了原核表达和分离纯化,为该蛋白应用于肿瘤免疫治疗奠定了基础.
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| 关 键 词： | MAGE-3 克隆 分子 基因表达 纯化 |
| 文章编号： | 1000-2790(2004)06-0485-04 |
| 修稿时间： | 2003-07-10 |
Cloning, prokaryotic expression and purification of tumor antigen gene MAGE-3 |
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| MA Jia Hai,SUI Yan Fang,YE Jing,HUANG Ya Yu,CHEN Guang Sheng,SONG Hong Ping,ZHANG Xiu Min. Cloning, prokaryotic expression and purification of tumor antigen gene MAGE-3[J]. Negative, 2004, 25(6): 485-488 |
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| Authors: | MA Jia Hai SUI Yan Fang YE Jing HUANG Ya Yu CHEN Guang Sheng SONG Hong Ping ZHANG Xiu Min |
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| Affiliation: | MA Jia Hai,SUI Yan Fang,YE Jing,HUANG Ya Yu,CHEN Guang Sheng,SONG Hong Ping,ZHANG Xiu Min Department of Pathology,School of Basic Medicine,Fourth Military Medical University,Xi'an 710033,China |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | MAGE-3 |
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