| 摘 要： | 目的:探讨紫甘蓝提取物(PCE)对人非小细胞肺癌A549细胞放射敏感性的影响及机制。方法:用CCK-8试验检测不同浓度PCE对细胞活力的影响,确定最佳剂量浓度。将对数生长期的A549细胞在6孔板中(每孔1×10~5个/ml)接种并分为6组∶对照组(CON,A组),10μmol/L PCE组(PCE-10μmol/L,B组)、50μmol/L PCE组(PCE-50μmol/L,C组)、照射组(IR,D组)、照射加10μmol/L PCE组(IR+PCE-10μmol/L,E组)、照射加50μmol/L PCE组(IR+PCE-50μmo/L,F组)。照射后,检测PCE对A549细胞增殖的影响。流式细胞术检测PCE对照射后A549细胞凋亡的影响。Western blot检测照射后PCE对A549细胞凋亡途径中关键蛋白表达的影响。用qRT-PCR检测不同浓度PCE照射前后miRNA326的表达。结果:CCK-8结果显示,PCE能明显抑制A549细胞的增殖,且随着药物浓度的增加,其增殖抑制率增加。流式细胞术结果显示,D组细胞凋亡率为7.63%±0.27%,E组为9.62%±0.42%,F组为17.50%±0.37%,相对于D组,PCE显著提高了E组和F组照射后A549细胞的凋亡率(P0.01)。qRT-PCR结果显示,E组、F组miRNA326的表达显著上调(P0.01),PCE能显著上调照射后A549细胞miRNA326的表达,且药物浓度越高,上调越明显。Western blot结果显示,PCE能显著降低Bcl-2的表达,增强Caspase-3和Caspase-9的活化,提高细胞凋亡水平。结论:PCE可通过上调miRNA326的表达和促进细胞凋亡来增强人非小细胞肺癌A549细胞的放射敏感性,且随着药物剂量的增加,其放射敏感性效应增强。
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