| miR-200c通过下调TUBB3基因表达逆转老年肺癌患者顺铂耐药性的机制 |
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| 引用本文： | 赵云龙,李少军,陈平,刘阳.miR-200c通过下调TUBB3基因表达逆转老年肺癌患者顺铂耐药性的机制[J].中华老年多器官疾病杂志,2020,19(6):433-438. |
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| 作者姓名： | 赵云龙 李少军 陈平 刘阳 |
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| 作者单位： | 解放军总医院第四医学中心胸外科,北京 100048,解放军总医院第四医学中心胸外科,北京 100048,解放军总医院第四医学中心胸外科,北京 100048,解放军总医院第一医学中心胸外科,北京 100853 |
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| 摘 要： | 目的探讨miR-200c逆转肺癌细胞顺铂耐药性的作用机制。方法 miR-200c模拟物转染肺癌A549细胞后,采用实时定量PCR法检测miR-200c的表达;采用细胞活力测定(MTS)法检测miR-200c对肺癌A549细胞顺铂耐受性的影响。采用流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞凋亡率的变化。采用Western blotting检测肿瘤细胞耐药蛋白survivin和Bcl-2蛋白的表达。通过生物信息学分析发现miR-200c下游靶分子TUBB3表达存在差异后,构建TUBB3 3′UTR的野生型和突变型荧光素酶报告载体,然后利用双荧光素酶活性分析miR-200c对TUBB3基因表达的结合位点和调控作用。通过Western blotting检测miR-200c对TUBB3蛋白表达的调控作用以及Bcl-2蛋白和肿瘤细胞耐药蛋白survivin的表达。采用SPSS 19.0统计软件分析实验数据。结果与对照组相比,miR-200c转染肺癌细胞株后,肺癌细胞对顺铂的敏感性呈明显增加趋势IC_(50)分别为(37.3±3.1)和(15.3±3.3)μmol/L,P0.01]。过表达miR-200c的A549/DDP组的细胞凋亡率明显高于NC组(P0.01)。而肿瘤耐药相关基因Bcl-2和survivin蛋白表达降低。转染miR-200c mimics的A549/DDP细胞中TUBB3蛋白和mRNA的表达均下调(P0.01)。双荧光素酶活性分析显示miR-200c对TUBB3基因表达具有调控作用(P0.01)。这些结果均证实TUBB3为miR-200c的下游靶基因。pcDNA-TUBB3质粒转染后,过表达miR-200c的A549/DDP细胞株survivin和Bcl-2蛋白表达较miR-200c mimics组上调。结论 miR-200c可通过下调TUBB3基因的表达逆转肺癌顺铂耐药细胞的耐药性。
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| 关 键 词： | miR-200c TUBB3基因表达 调控机制 |
| 收稿时间： | 2020/3/8 0:00:00 |
miR-200c reverses cisplatin resistance in elderly lung cancer patients by downregulating TUBB3 gene |
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| ZHAO Yun-Long,LI Shao-Jun,CHEN Ping and LIU Yang.miR-200c reverses cisplatin resistance in elderly lung cancer patients by downregulating TUBB3 gene[J].Chinrse journal of Multiple Organ Diseases in the Elderly,2020,19(6):433-438. |
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| Authors: | ZHAO Yun-Long LI Shao-Jun CHEN Ping and LIU Yang |
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| Institution: | Department of Thoracic Surgery, Fourth Medical Center, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100048, China,Department of Thoracic Surgery, Fourth Medical Center, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100048, China,Department of Thoracic Surgery, Fourth Medical Center, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100048, China and Department of Thoracic Surgery, First Medical Center, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100853, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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