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发色底物法定量测定重组u-PA产品的总活性和单链比例
引用本文:胡显文,高丽华,李世崇,胥照平,张正光,肖成祖,饶春明,张翊,姜燕,胡铁强.发色底物法定量测定重组u-PA产品的总活性和单链比例[J].军事医学科学院院刊,2003,27(5):349-352,376.
作者姓名:胡显文  高丽华  李世崇  胥照平  张正光  肖成祖  饶春明  张翊  姜燕  胡铁强
作者单位:1. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071
2. 中国药品及生物制品检定所,北京,100050
3. 天津天士力集团,天津,300402
基金项目:国家高技术研究发展计划项目资助(Z18-03-12)
摘    要:目的建立一种发色底物酶水解方法定量分析重组尿激酶型纤溶酶原激活剂(u-PA)中的总活性及其单链酶原比例.方法用嗜热菌蛋白酶激活u-PA转化成具有催化活性的双链尿激酶,再用尿激酶的发色底物S-2444测定u-PA的总活性.在非激活条件下,u-PA产品中的单链酶原不会催化水解S-2444底物,因而可以测定其单链酶原比例.结果优化了嗜热菌蛋白酶激活u-PA的反应条件和尿激酶催化水解S-2444的反应条件.用这种方法测定了用CHO细胞表达的基因重组u-PA产品,单链比例大于98%,比活性约为11×104 U/mg.结论用发色底物法测定重组人u-PA产品中的总活性和单链比例具有很好的重复性和准确性.

关 键 词:发色底物法  定量测定  重组u-PA产品  总活性  单链比例  尿激酶型纤溶酶原激活剂
文章编号:1000-5501(2003)05-0349-05

Quantitative measurement of total activity and scu-PA ratio of recombinant u-PA product with a chromogenic substrate
HU Xian-Wen ,GAO Li-Hua ,LI Shi-Chong ,XU Zhao-Ping ,ZHANG Zheng-Guang ,XIAO Cheng-Zu ,RAO Chun-Ming ,ZHANG Yu ,JIANG Yan ,HU Tie-Qiang.Quantitative measurement of total activity and scu-PA ratio of recombinant u-PA product with a chromogenic substrate[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2003,27(5):349-352,376.
Authors:HU Xian-Wen  GAO Li-Hua  LI Shi-Chong  XU Zhao-Ping  ZHANG Zheng-Guang  XIAO Cheng-Zu  RAO Chun-Ming  ZHANG Yu  JIANG Yan  HU Tie-Qiang
Institution:HU Xian-Wen 1,GAO Li-Hua 1,LI Shi-Chong 1,XU Zhao-Ping 1,ZHANG Zheng-Guang 1,XIAO Cheng-Zu 1,RAO Chun-Ming 2,ZHANG Yu 2,JIANG Yan 3,HU Tie-Qiang 3
Abstract:
Keywords:urokinase-type plasminogen activator  activity  S-2444  prourokinase  thermolysin
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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