| Cdh1小干扰RNA载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 柳璐,姚文龙,祝畅,桂伶俐,张传汉. Cdh1小干扰RNA载体的构建及鉴定[J]. 医学争鸣, 2007, 28(17): 1544-1546 |
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| 作者姓名： | 柳璐 姚文龙 祝畅 桂伶俐 张传汉 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学教研室,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学教研室,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学教研室,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学教研室,湖北,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学教研室,湖北,武汉,430030 |
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| 摘 要： | 目的:构建Cdh1小干扰RNA载体,并将其转染至Hela细胞进行鉴定.方法:根据pENTRTM/H1/TO中间载体要求,设计Cdh1小干扰RNA载体的干扰序列及无干扰作用的对照序列,合成相应的DNA单链,退火后连接到pENTRTM/H1/TO线性载体,形成完整载体,进行测序鉴定.分别将测序鉴定成功的Cdh1小干扰RNA载体及对照载体采用脂质体法转染Hela细胞,转染后48 h提取细胞总RNA及细胞总蛋白,采用实时定量PCR和Western Blot检测Cdh1的表达.结果:经测序鉴定成功构建Cdh1小干扰RNA载体和对照载体,分别命名为pENTR/shCdh1和pENTR/shcontrol.与未转染及转染pENTR/shcontrol的Hela细胞相比,转染pENTR/shCdh1的Hela细胞Cdh1表达降低(P《0.05).结论:成功构建Cdh1小干扰RNA载体,并能下调Hela细胞Cdh1的表达.
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| 关 键 词： | 细胞周期 细胞分裂 RNA 小干扰 Hela细胞 |
| 文章编号： | 1000-2790（2007）17-1544-03 |
| 修稿时间： | 2007-03-062007-04-04 |
Construction and identification of Cdh1 small interfering RNA eukaryotic vector |
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| LIU Lu,YAO Wen-Long,ZHU Chang,GUI Ling-Li,ZHANG Chuan-Han. Construction and identification of Cdh1 small interfering RNA eukaryotic vector[J]. Negative, 2007, 28(17): 1544-1546 |
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| Authors: | LIU Lu YAO Wen-Long ZHU Chang GUI Ling-Li ZHANG Chuan-Han |
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| Affiliation: | Department of Anesthesiology, Tongji Hospital, Tongji Medical University, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cell cycle cell division RNA, small interfering Hela cells |
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