| 抗肝癌单链抗体融合PE38重组免疫毒素的构建、表达及纯化 |
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| 引用本文： | 赵强子,刘彦仿,窦科峰,张静,李开宗. 抗肝癌单链抗体融合PE38重组免疫毒素的构建、表达及纯化[J]. 医学争鸣, 2003, 24(9): 809-812 |
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| 作者姓名： | 赵强子 刘彦仿 窦科峰 张静 李开宗 |
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| 作者单位： | 第四军医大学,西京医院肝胆外科,陕西,西安,710033;第四军医大学,基础部病理学教研室,陕西,西安,710033 |
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| 基金项目： | 全军医药卫生科研基金 (98MO98) |
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| 摘 要： | 目的 :构建绿脓杆菌外毒素PE38融合人源化鼠抗肝癌单链抗体 (hscFv)原核表达载体 ,并对其产物作初步纯化 ,检测其对人肝癌细胞系SMMC 772 1的毒性作用 .方法 :采用基因工程原理 ,将PE38基因片段亚克隆入hscFv表达载体 pGEX 4T 1中 ,重组克隆载体经酶切及DNA序列测定证实两片段连接正确 ;转化大肠杆菌JM10 9后 ,受IPTG诱导表达GST融合蛋白 ,产物包涵体经变性、复性及重折叠并经GST亲合层析柱层析、凝血酶消化后 ,得到纯化的hscFv PE38融合蛋白 .采用MTT法检测hscFv PE38对SMMC772 1的杀伤作用 .结果 :实验成功构建了免疫毒素表达载体pGEX 4T 1 hscFv PE38(以下简称pGEXh PE38) ;诱导产物主要以包涵体形式存在 ,表达量为 11% ;纯化的hscFv PE38对SMMC 772 1细胞系具有较明显的杀伤作用 ,最大杀伤率为78% ,IC50 为 0 .386mg·L-1.结论 :人源化抗肝癌单链抗体与PE38重组免疫毒素的成功表达纯化及对人肝癌细胞系的试验结果 ,为进一步肝癌的导向治疗提供依据
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| 关 键 词： | PE38 免疫毒素 癌 肝细胞 表达 纯化 |
| 文章编号： | 1000-2790(2003)09-0809-04 |
| 修稿时间： | 2002-08-29 |
Construction and purification of a recombinant immunotoxin composed of PE38 and humanized scFv against hepatocellular carcinoma |
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| ZHAO Qiang Zi ,LIU Yan Fang ,DOU Ke Feng ,ZHANG Jing ,LI Kai Zong. Construction and purification of a recombinant immunotoxin composed of PE38 and humanized scFv against hepatocellular carcinoma[J]. Negative, 2003, 24(9): 809-812 |
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| Authors: | ZHAO Qiang Zi LIU Yan Fang DOU Ke Feng ZHANG Jing LI Kai Zong |
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| Affiliation: | ZHAO Qiang Zi 1,LIU Yan Fang 2,DOU Ke Feng 1,ZHANG Jing 2,LI Kai Zong 1 1Department of Hepatobiliary Surgery,Xijing Hospital,2Department of Pathology,School of Basic Medicine,Fourth Military Medical University,Xi'an 710033,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PE38 immunotoxins hepatocelluar carcinoma expression purification |
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