HPV16E6E7转导的卵巢癌细胞系顺铂耐药性的变化

目的　人乳头瘤病毒 16型 E6 E7区基因编码的蛋白具有转导人上皮细胞 ,使之获得永生化特性的作用。为建立卵巢癌永生细胞系 ,我们对 HPV16 E6 E7转导卵巢癌细胞的方法及转导细胞对顺铂的耐药性进行了研究。　方法　采用脂质体方法 ,将含有 HPV16 E6 E7的重组逆转录病毒载体 p L XSN16 E6 E7,转染逆转录病毒包装细胞 PT6 7,经 G418筛选 ,病毒滴度测定 ,筛选出 1株高滴度 (1.9× 10 7/m l)的产病毒克隆 ,将之转导卵巢癌细胞系SKOV3、3AO,各筛选出 1株稳定表达 HPV16 E6 E7的克隆 ,SKOV3/E6 E7、3AO/E6 E7。经 RT- PCR、免疫细胞化学检测证实 HPV16 E6 E7的表达 ,之后采用 MTT法检测了 HPV16 E6 E7转导的卵巢癌细胞系对顺铂耐药性的变化。结果　 HPV16 E6 E7转导的卵巢癌细胞系 SKOV3/E6 E7、3AO/E6 E7对顺铂的耐药性无改变。　结论　HPV16 E6 E7转导的卵巢癌细胞没有发生顺铂耐药性的改变。本研究为采用此法建立卵巢癌永生细胞系 ,特别是建立耐药卵巢癌细胞系奠定了基础。