临床分离铜绿假单胞菌喹诺酮耐药株gyrA基因突变及其对β-内酰胺类药物敏感性研究

利用PCR、限制性片段多态性分析（RFLP）、DNA单链构像多态性分析（SSCP）和DNA测序等方法，对10株成都地区临床分离耐喹诺酮类药物铜绿假单孢菌gyrA基因进行研究。结果表明，成都地区耐喹诺酮类药物铜绿假单胞菌gyrA的喹诺酮耐药决定区编码等83位氨基酸密码子表现出高频单点突变（10株中有8株），其突变方式为ACC→ATC。gyrA的PCR扩增产物SacII酶切片段与测序结果一致。SSCP的带谱与测序结果比较，除1株（PSA2）的SSCP带谱与标准株相同，但测序结果有点突变外，其余菌株与测序结果一致。因此，利用PCR－SSCP－RFLP系统，可快速、准确的检测耐喹诺酮类药物的铜绿假单胞菌gyrA中至少一个碱基的差异。用二倍稀释法测定喹诺酮和β－内酰胺类药物对耐药突变株体外抗菌活性，结果表明，铜绿假单胞菌gyrA基因突变株对诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、头孢他啶、亚胺培南和哌拉西林表现出不同的敏感性。试验所用8株突变株对诺氟沙星和环丙沙星表现出高水平抗性；3株对左氧氟沙星敏感；3株对头孢他啶和哌拉西林表现出耐药，2株对亚胺培南耐药。

Study on the gyrA mutation and susceptibility to β-lactams in quinolone resistant clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa