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上皮细胞来源的外泌体通过TLR/MyD88信号通路促进BCG诱导的巨噬细胞的炎症反应
作者姓名:郭媛媛  尤学红  丁学华  刘晓明  马春燕
作者单位:750021银川,宁夏大学生命科学学院宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室;750021银川,宁夏大学生命科学学院宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室;750021银川,宁夏大学生命科学学院宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室;750021银川,宁夏大学生命科学学院宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室;750021银川,宁夏大学生命科学学院宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室
基金项目:国家自然科学基金;宁夏回族自治区自然科学基金
摘    要:目的探究上皮细胞来源的外泌体在BCG(卡介苗)感染巨噬细胞产生炎性反应中的调控作用。方法本研究通过试剂盒提取经BCG感染及未感染的人正常上皮细胞中的外泌体并对其进行鉴定;将用染料标记的外泌体与巨噬细胞共孵育观察与巨噬细胞的作用过程;ELISA方法检测外泌体刺激后巨噬细胞上清中炎性因子IL-6、IL-1β的含量;蛋白免疫印迹法检测巨噬细胞中TLR2、TLR4、TLR6、MyD88、NF-κВ及TRAF6蛋白的表达。结果纯化获得的外泌体在电镜下呈茶托状,大小在30~100 nm;并表达外泌体的表面分子标志CD9、HSP70;DIR红色染料标记的外泌体被巨噬细胞吞噬进入胞内;经外泌体刺激能够显著增加巨噬细胞分泌的炎性因子IL-6、IL-1β(P<0.001);且与BCG单独处理组比较,无论BCG预处理上皮细胞或未处理的外泌体都能进一步升高BCG诱导的巨噬细胞分泌炎性因子水平(P<0.05);同时TLR信号TLR2、TLR4、TLR6以及MyD88、NF-κВ、TRAF6蛋白在巨噬细胞受外泌体刺激后表达均显著上调(P<0.05)。结论上皮细胞来源的外泌体通过激活TLR/MyD...

关 键 词:肺脏上皮细胞  外泌体  巨噬细胞  BCG  炎症
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