重组腺病毒表达的融合蛋白SH2-caspase 8对K562细胞凋亡的影响 |
| |
引用本文: | 王林,李会,刘章玲,祖白玲,黄峥兰,向华,冯文莉. 重组腺病毒表达的融合蛋白SH2-caspase 8对K562细胞凋亡的影响[J]. 临床检验杂志, 2013, 31(8): 612-616 |
| |
作者姓名: | 王林 李会 刘章玲 祖白玲 黄峥兰 向华 冯文莉 |
| |
作者单位: | 重庆医科大学检验医学院/临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆400016;重庆医科大学检验医学院/临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆400016;重庆医科大学检验医学院/临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆400016;重庆医科大学检验医学院/临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆400016;重庆医科大学检验医学院/临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆400016;重庆医科大学检验医学院/临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆400016;重庆医科大学检验医学院/临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆400016 |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金(30871102)。 |
| |
摘 要: | 摘要:目的:研究表达融合蛋白SH2-caspase 8的重组腺病毒AdE-SH2-caspase 8-HA-GFP(SC)对BCR/ABL阳性的慢性粒细胞白血病K562细胞凋亡的影响。 方法:将重组的腺病毒SC转染K562细胞(SC组),分别设突变AdE-SH2m-caspase 8-HA-GFP(SmC)组、病毒空载体AdEGFP(CMV)组和PBS对照组。用荧光显微镜和流式细胞仪(FCM)检测病毒转染效率,western blot检测融合蛋白及凋亡相关蛋白caspase 3、多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)的表达情况,用光学显微镜观察经瑞氏染色后的细胞形态,FCM和DNA梯度电泳检测细胞凋亡情况。 结果:FCM和荧光显微镜检查结果显示,重组腺病毒在K562细胞中的转染效率较高;融合蛋白SH2-caspase 8-HA和SH2m-caspase 8-HA可在K562细胞中表达;瑞氏染色后SC组出现明显的凋亡形态改变;FCM检测结果表明, SC组与SmC组、CMV组和PBS组相比较,其早期凋亡细胞明显增高(t分别为6.945、19.083和16.470,P均<0.05),DNA梯度电泳检测结果发现SC组和SmC组可出现细胞凋亡特异性的梯度条带,western blot结果表明,SC组和SmC组凋亡相关蛋白caspase 3、PARP活化片段的表达水平升高。 结论:重组腺病毒SC表达的SH2-caspase 8融合蛋白能明显诱导K562细胞的凋亡。
|
关 键 词: | 细胞凋亡;SH2结构域;半胱天冬酶8(caspase 8);融合蛋白;K562细胞 |
收稿时间: | 2013-07-02 |
Effect of SH2-caspase 8 fusion protein expressed by recombinant adenovirus on apoptosis of K562 cell line |
| |
Abstract: |
|
| |
Keywords: | cell apoptosis Src homology-2 domain caspase 8 fusion protein K562 cell |
|
| 点击此处可从《临床检验杂志》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《临床检验杂志》下载全文 |