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软骨微粒脱细胞基质微载体的制备及其特性研究
作者姓名:韩雪峰  杨大平  郭铁芳  方冬云  张颖  孟娟
作者单位:[1]哈尔滨医科大学附属第二临床医学院整形外科,黑龙江省哈尔滨市150086 [2]哈尔滨医科大学附属第二临床医学院病理科,黑龙江省哈尔滨市150086 [3]哈尔滨医科大学附属第二临床医学院实验中心,黑龙江省哈尔滨市150086
摘    要:目的:制备以软骨微粒脱细胞基质为原料的微载体,为体外大量培养软骨细胞提供实验依据。方法:利用胰蛋白酶等试剂制备直径为0.100∽0.154mm的软骨微粒脱细胞基质并寻找胰蛋白酶的最佳含量及时间。取绵羊的新鲜膝、肘关节软骨600g,随机分为5组,每组8例,用不同含量的胰蛋白酶作用2∽36h。标本进行大体观察,苏木精-伊红、胶原染色,光镜及扫描电镜观察,密度、含水量测定。结果:微粒软骨脱细胞基质微载体无抗原性成分存在,主要含有胶原,氨基葡聚糖等混合细胞外基质成分。微粒呈不规则形,表面粗糙。软骨微粒脱细胞基质干重密度为0.6547g/mL,湿重密度为1.0627g/mL,含水量为72%。胰蛋白酶的最佳含量为0.25g/L,最适作用时间为(18.3&;#177;1.6)h。结论:以软骨微粒为原料的微载体具有天然细胞外基质成分,是一种体外培养软骨细胞的良好载体。

关 键 词:软骨 微粒体 细胞培养
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