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多重RT—PCR技术检测儿童呼吸道标本中的常见病毒
引用本文:曾凡胜,陆学东,王琼,罗小芳,黄烈,吴润香. 多重RT—PCR技术检测儿童呼吸道标本中的常见病毒[J]. 现代检验医学杂志, 2009, 24(3). DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2009.03.047
作者姓名:曾凡胜  陆学东  王琼  罗小芳  黄烈  吴润香
作者单位:1. 广东医学院,广东湛江,524023
2. 广东医学院附属深圳市福田人民医院检验科,广东深圳,518033
摘    要:
目的 建立多重RT-PCR技术检测儿科呼吸道标本中常见病毒的方法.方法 参照病毒核酸序列设计多重RT-PCR引物,并检索NCBI数据库初步验证其特异性,以实验室阳性株验证引物特异性,优化多重RT-PCR反应条件.并对2008年61份儿童呼吸道标本进行检测,阳性片段测序验证扩增片段特异性.结果 采用多重RT-PCR引物对流感病毒A型(IVA)、流感病毒B型(IVB)、副流感病毒1型(PIV1)、副流感病毒3型(PIV3)、呼吸道合胞病毒(RSV)和鼻病毒(RHV)等6种病毒进行扩增,均无非特异性扩增条带,分别获得171,489,307,585,155,501 bp片段,与设计相符;对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果,61份儿童呼吸道标本多重RT-PCR扩增,阳性率为50.82%(31/61),核酸序列与经NCBI数据库Blast比对同源性高.结论 实验证明,所建立的多重RT-PCR技术检测儿童呼吸道标本中常见病毒的方法,敏感度、特异度和可重复性均较好,为常见呼吸道病毒检测提供了一种方便易行的方法.

关 键 词:呼吸道病毒  多重RT-PCR

Detection of Common Virus in Respiratory Samples of Children by Multiplex RT-PCR
ZENG Fan-sheng,LU Xue-dong,WANG Qiong,LUO Xiao-fang,HUANG Lie,WU Run-xiang. Detection of Common Virus in Respiratory Samples of Children by Multiplex RT-PCR[J]. Journal of Modern Laboratory Medicine, 2009, 24(3). DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2009.03.047
Authors:ZENG Fan-sheng  LU Xue-dong  WANG Qiong  LUO Xiao-fang  HUANG Lie  WU Run-xiang
Abstract:
Keywords:
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