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EGF-IL-18在毕赤酵母中的表达
引用本文:张欢,蔡小波,施晓琴,王震,吕建新.EGF-IL-18在毕赤酵母中的表达[J].温州医学院学报,2010,40(4):322-325.
作者姓名:张欢  蔡小波  施晓琴  王震  吕建新
作者单位:温州医学院,浙江省医学遗传学重点实验室,浙江,温州,325035
基金项目:浙江省科技厅重大科技专项和优先主题计划资助项目,浙江省教育厅2008年度大学生科技创新活动计划立项资助项目 
摘    要:目的:在甲醇营养型毕赤酵母表达系统中分泌表达人表皮生长因子受体干扰基序和白细胞介素-18(EGF-IL-18)融合蛋白。方法:PCR扩增EGF-IL-18基因,克隆到表达载体pPIC9K,重组质粒经线性化后用电转化导入毕赤酵母GS115,筛选重组子,经摇瓶培养,用甲醇诱导表达EGF-IL-18融合蛋白。结果:序列分析表明,克隆到pPIC9K载体中的EGF-IL-18基因与设计相符,SDS-PAGE电泳分析显示表达产物EGF-IL-18以可溶性分子存在于酵母培养基中,Western印记表明表达产物EGF-IL-18具有良好的抗原性。结论:重组蛋白EGF-IL-18在毕赤酵母GS115中成功分泌表达。

关 键 词:重组融合蛋白质类  EGF-IL-18  克隆  分子  毕赤酵母

Expression of EGF-IL-18 in pichia pastoris
ZHANG Huan,CAI Xiaobo,SHI Xiaoqin,WANG Zhen,LV Jianxin.Expression of EGF-IL-18 in pichia pastoris[J].Journal of Wenzhou Medical College,2010,40(4):322-325.
Authors:ZHANG Huan  CAI Xiaobo  SHI Xiaoqin  WANG Zhen  LV Jianxin
Institution:ZHANG Huan,CAI Xiaobo,SHI Xiaoqin,WANG Zhen,LV Jianxin. Zhejiang Provinicial Key Lab of Medical Genetics,Wenzhou Medical College,Wenzhou,325035
Abstract:Objective:To express human epidermal growth factor receptor interferential motif and interleukin-18(EGF-IL-18)fusion protein in the methylotrophic pichia pastoris expression system.Methods:EGF-IL-18 gene was amplified by PCR,and then cloned into the expression vector of pPIC9K.The pPIC9K-EGF-IL-18 was linearized and electrotransformed into Pichia pastoris GS115.The recombinants were screened and then induced by methanol in shake flask cultures.Results:DNA sequencing analysis showed that the sequence of clon...
Keywords:EGF-IL-18
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