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A群脑膜炎奈瑟球菌多糖单克隆抗体的制备及其应用
引用本文:舒 曼,鲁卫东,钱 雯,马 波,叶红艳,黄 微,兰 萍.A群脑膜炎奈瑟球菌多糖单克隆抗体的制备及其应用[J].南京医科大学学报,2016(11):1339-1343.
作者姓名:舒 曼  鲁卫东  钱 雯  马 波  叶红艳  黄 微  兰 萍
作者单位:昆明医科大学暨云南省天然药物药理重点实验室,云南 昆明 650500,昆明医科大学暨云南省天然药物药理重点实验室,云南 昆明 650500,沃森生物技术股份有限公司,云南 昆明 650106,沃森生物技术股份有限公司,云南 昆明 650106,昆明医科大学暨云南省天然药物药理重点实验室,云南 昆明 650500,沃森生物技术股份有限公司,云南 昆明 650106,昆明医科大学暨云南省天然药物药理重点实验室,云南 昆明 650500
摘    要:目的:筛选能分泌A群脑膜炎奈瑟球菌多糖抗体的杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体,运用该单抗建立检测ACYW135群脑膜炎奈瑟球菌多糖疫苗中A群多糖的竞争ELISA方法?方法:运用经典的杂交瘤技术筛选杂交瘤细胞株,采用小鼠腹腔注射收获腹水型单克隆抗体,优化条件建立间接竞争ELISA,分别测定5支同一批和3个不同批次的ACYW135群脑膜炎奈瑟球菌多糖疫苗成品中的A群多糖含量,检测结果应用SPSS软件做单样本t检验分析?结果:标准曲线经Log-logit处理,得到回归方程:y=-1.664 8-2.254 2x,R 2=0.989 5,线性范围0.022 8~1.200 7 μg/mL,IC50为0.165 8 μg/mL,最低检测限为0.022 8 μg/mL,检测疫苗中A群多糖含量,检测值与疫苗标示量无统计学差异(P > 0.05)?结论:成功筛选杂交瘤细胞株,制备A群多糖特异性单克隆抗体,建立的间接竞争ELISA方法,灵敏度高?稳定性好?可重复性强,可用于脑膜炎奈瑟球菌多糖疫苗研发过程中的定量检测,能克服磷含量法和火箭免疫电泳法检测A群多糖含量的缺点?

关 键 词:杂交瘤细胞株  单克隆抗体  流脑疫苗
收稿时间:3/7/2016 12:00:00 AM

Preparation of group A Neisseria meningitidis polysaccharide and its applications
Shu Man,Lu Weidong,Qian Wen,Ma Bo,Ye Hongyan,Huang Wei and Lan Ping.Preparation of group A Neisseria meningitidis polysaccharide and its applications[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2016(11):1339-1343.
Authors:Shu Man  Lu Weidong  Qian Wen  Ma Bo  Ye Hongyan  Huang Wei and Lan Ping
Institution:Key Laboratory of Natural Medicine Pharmacology,Kunming Medical University,Kunming 650500,Key Laboratory of Natural Medicine Pharmacology,Kunming Medical University,Kunming 650500,Yunnan Wosen Biotechnology Co. Ltd,Kunming 650106,China,Yunnan Wosen Biotechnology Co. Ltd,Kunming 650106,China,Key Laboratory of Natural Medicine Pharmacology,Kunming Medical University,Kunming 650500,Yunnan Wosen Biotechnology Co. Ltd,Kunming 650106,China and Key Laboratory of Natural Medicine Pharmacology,Kunming Medical University,Kunming 650500
Abstract:
Keywords:hybridoma cell  McAb  meningococcal vaccine
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