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骨髓内皮祖细胞EPCs两种分离方法及其对比研究
引用本文:郑奇军,刘维永,易定华,俞世强,刘洋,欧阳辉,程亮,蔡振杰. 骨髓内皮祖细胞EPCs两种分离方法及其对比研究[J]. 医学争鸣, 2008, 29(4): 305-309
作者姓名:郑奇军  刘维永  易定华  俞世强  刘洋  欧阳辉  程亮  蔡振杰
作者单位:第四军医大学西京医院心脏外科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院心脏外科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院心脏外科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院心脏外科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院心脏外科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院心脏外科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院心脏外科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院心脏外科,陕西,西安,710033
摘    要:目的:研究免疫磁珠法和贴壁换液法分离骨髓内皮祖细胞的可行性和条件,并比较两种方法优缺点.方法:利用免疫磁珠法和贴壁换液法从骨髓中分别提取内皮祖细胞,体外观察细胞生长及形态变化,通过检测细胞血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)、Ⅷ因子相关抗原抗体表达、摄取乙酰化-低密度脂蛋白(Ac-LDL)情况和超微结构等进行鉴定.同时,流式细胞检测分离所得细胞的纯度、细胞计数测定分离所得细胞的数量及MTT法检测细胞生长增殖状况等,对两种分离方法进行对比研究.结果:用免疫磁珠法和贴壁换液法从骨髓中分别提取的细胞,体外培养后细胞呈铺路石形,透射电镜显示细胞内具有特征性的W-P小体,免疫荧光染色检测细胞相关抗原VEGFR-2, Ⅷ/vWF 呈阳性,同时细胞摄取Ac-LDL,证实为内皮祖细胞.免疫磁珠法与贴壁换液法相比,分离所得内皮祖细胞数量是后者2倍,纯度为76%,明显高于贴壁换液法的29%;同时,两者对细胞增殖生长无明显影响.结论:利用免疫磁珠法和贴壁换液法均可分离得到骨髓内皮祖细胞,它将成为新的组织工程种子细胞.免疫磁珠法分离得到细胞纯度更高、数量更大,但步骤复杂、价格昂贵;贴壁换液法得到细胞纯度和数量偏低,但方法简单、经济、实用性强.

关 键 词:骨髓  内皮祖细胞  免疫磁珠法  贴壁换液法
文章编号:1000-2790(2008)04-0305-05
收稿时间:2007-10-30
修稿时间:2007-11-20

Comparative study on two separating methods of bone marrow-derived endothelial progenitor cells in vitro
ZHENG Qi-Jun,LIU Wei-Yong,YI Ding-Hua,YU Shi-Qiang,LIU Yang,OUYANG Hui,CHENG Liang,CAI Zhen-Jie. Comparative study on two separating methods of bone marrow-derived endothelial progenitor cells in vitro[J]. Negative, 2008, 29(4): 305-309
Authors:ZHENG Qi-Jun  LIU Wei-Yong  YI Ding-Hua  YU Shi-Qiang  LIU Yang  OUYANG Hui  CHENG Liang  CAI Zhen-Jie
Abstract:
Keywords:bone marrow    endothelial progenitor cells    MiniMACS   attachment-changing culture methods
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