推拿对骨骼肌急性钝挫伤模型大鼠炎症、氧化应激及细胞自噬相关因子的影响

目的 观察推拿对大鼠骨骼肌急性钝挫伤修复过程中炎症、氧化应激、细胞自噬相关因子的影响，探讨推拿治疗骨骼肌损伤可能的作用机制。 方法 采用随机数字表法将42只成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠分为正常组（n=6）、模型组（n=18）、治疗组（n=18），模型组和治疗组再根据取材的时间点随机分为1d、7d、14d三个亚组（n=6）。模型组和治疗组用自备打击器建立腓肠肌急性钝挫伤模型，治疗组于造模48h后开始推拿治疗，每日1次，每次15min。各组分别于各自的取材时间点心脏采血后取损伤侧腓肠肌，苏木精-伊红染色(HE）观察损伤部位腓肠肌形态学变化；酶联免疫法（ELISA）检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、C反应蛋白（CRP）、前列腺素E2（PGE2）表达水平；紫外-可见分光光度法检测各组大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA）含量；Western blotting检测各组大鼠腓肠肌自噬微管相关蛋白1轻链3（LC3）、Bcl-2同源结构域蛋白Beclin1、泛素结合蛋白P62表达水平。 结果 骨骼肌损伤修复过程中，HE染色显示，各时间点模型组较正常组细胞形态崩塌，肿胀明显，7d和14d亚组有成肌细胞核出现。各时间点治疗组较模型组恢复更好，新生肌细胞较多，形态更趋正常。ELISA结果显示，模型组各取材时间点较正常组同取材时间点血清促炎因子明显升高，但治疗组1d和7d组较模型组同取材时间点显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。紫外-可见分光光度法结果显示，模型组血清SOD和MDA含量较正常组明显升高，治疗组SOD较模型组同取材时间点显著升高，差异有统计学意义（P<0.05），MDA较模型组同取材时间点显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。Western blotting结果显示，模型组各取材时间点较正常组腓肠肌LC3（II/I）、Beclin1明显降低，P62明显升高，而治疗组较模型组同取材时间点LC3（II/I）、Beclin1显著升高，P62显著降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 骨骼肌损伤后，其炎症及氧化应激水平明显升高，细胞自噬活性明显降低，通过推拿治疗能有效减轻机体炎症反应，降低其氧化应激损害，提高组织细胞自噬活性，从而加速受损组织的修复，这可能是推拿促进骨骼肌损伤修复的机制之一。