小白菊内酯对人小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖及凋亡作用研究

目的：研究小白菊内酯（parthenolide，PTL）对人小细胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）细胞株NCI-H446增殖及凋亡作用的影响及其可能的分子机制。方法：NCI-H446细胞株由武汉大学细胞库提供，PTL购于Gene Operation公司，将NCI-H446细胞株分为对照组和实验组（1.5 μg/mL组、2.0 μg/mL组、2.5 μg/mL组和3.0 μg/mL组），向实验组细胞培养基中加入对应浓度PTL处理细胞，对照组中加入等体积无血清培养基。MTT比色法观测不同浓度PTL对NCI-H446细胞增殖的影响；Hochest 33258染色后，荧光显微镜下观察细胞核形态学变化；流式细胞术（flow cytometry，FCM）分析细胞凋亡率；RT-PCR分别检测不同浓度组PTL处理48 h后细胞中NF-κB、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9基因的表达状态，Wsetern blot检测NF-κB、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白的表达状态。结果：PTL抑制小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖并呈浓度依赖性；Hochest 33258染色结果显示，PTL作用NCI-H446细胞48 h后，细胞数量减少，细胞核固缩碎裂，形成凋亡小体，导致细胞凋亡；流式细胞术检测显示，PTL处理NCI-H446细胞后，细胞凋亡率与药物浓度梯度呈浓度依赖性，差异有统计学意义（P＜0.05）；RT-PCR及Wsetern blot结果显示，与对照组比较，经PTL处理的 NCI-H446细胞中NF-κB mRNA及蛋白表达下调，同时Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 mRNA及蛋白表达上调，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：PTL能抑制NCI-H446细胞的增殖并诱导其发生凋亡，PTL的作用机制可能与抑制NF-κB信号通路及活化Caspase系统有关。

Effects of parthenolide on the proliferation and apoptosis of small cell lung cancer cell line NCI-H446