人参皂甙-Rb1通过促进神经元线粒体自噬治疗大鼠创伤性颅脑损伤的机制

目的] 观察人参皂甙-Rb1(ginsenoside-Rb1，GS-Rb1)对大鼠创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury，TBI)的治疗作用与神经元线粒体自噬激活的关系。方法] 将80只体质量350～400 g的SD雄性大鼠随机分为假手术组、TBI组、治疗(TBI+GS-Rb1)组和自噬阻断TBI+GS-Rb1+6-氨基-3-甲基嘌呤(3-methyladenine，3-MA)]组，每组20只。以液压打击仪建立TBI模型，根据上述分组，分别给予腹腔注射GS-Rb1及自噬抑制剂3-MA。每组选10只大鼠进行行为学检测，并以苏木精-伊红(hematoxylin-eosin， HE)染色行神经元形态学检测。其余10只分离海马区皮质，以免疫印迹法检测自噬相关轻链蛋白3-Ⅱ/轻链蛋白3-Ⅰ(light chain 3-Ⅱ/ light chain 3-Ⅰ，LC3-Ⅱ/ LC3-Ⅰ)、自噬接头蛋白(sequestosome-1，P62)、线粒体功能相关蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子-1 alpha(peroxisome proliferators-activated receptor γ coactivator-1 alpha，PGC-1α)、线粒体外膜转位蛋白20(translocase of outer mitochondrial membrane 20，TOM20)及凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2基因相关X蛋白(B cell lymphoma-2 associated X protein，Bax)、裂解的半胱天冬酶3(cleaved-cysteinyl aspartate specific proteinase 3，cleaved-caspase 3)的表达；采用黄嘌呤氧化酶法、硫酸代巴比妥法、二硫代硝基苯甲酸缩合法分别检测氧化应激相关因子超氧物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde，MDA)及谷胱甘肽(glutathione，GSH)水平。结果] 与TBI组比较，治疗组神经损伤严重程度评分(neurological severity score，NSS)明显下降(P＜0.05)，神经元损伤程度明显缓解，自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/ LC3-Ⅰ比例明显升高，而P62表达明显降低，线粒体功能及结构相关蛋白PGC-1α、TOM20则明显升高，MDA水平明显降低，而SOD和GSH则呈相反趋势(P＜0.05)，凋亡促进因子Bax及cleaved-caspase 3表达明显降低(P＜0.05)。采用自噬抑制剂3-MA可明显抑制GS-Rb1对TBI后神经功能及形态损伤的治疗效应(P＜0.05)。结论] GS-Rb1可能通过促进神经元线粒体自噬，抑制凋亡途径，从而保护神经元，以起到对TBI的治疗作用。

The Mechanism of Ginsenoside-Rb1 in Treating Traumatic Brain Injury Rats by Promoting Mitophagy