Wnt3a联合BMP9诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化 |
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引用本文: | 刘书霞,耿雪静,房松华,陈沅.Wnt3a联合BMP9诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化[J].细胞与分子免疫学杂志,2015(4):448-451. |
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作者姓名: | 刘书霞 耿雪静 房松华 陈沅 |
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作者单位: | 重庆医科大学附属儿童医院儿童发育疾病研究教育部重点实验室,儿科学重庆市重点实验室,重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地;重庆医科大学附属儿童医院心血管内科 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(30772361) |
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摘 要: | 目的探讨Wnt3a单独以及联合骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化的作用。方法利用HEK293细胞扩增重组腺病毒AdGFP、AdBMP9、AdWnt3a;分别转染C3H10T1/2细胞3周后,倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态及绿色荧光蛋白表达;流式细胞术检测细胞转染效率;Westernblot法、免疫荧光技术及实时定量PCR(qRT-PCR)分别检测缝隙连接蛋白43(Cx43)、肌钙蛋白T(cTnT)、GATA结合蛋白4(GATA4)、心肌细胞增强因子2C(MEF2C)的表达。结果经HEK293细胞扩增可得到高滴度的重组腺病毒;转染C3H10T1/2细胞3周后,Wnt3a组Cx43、cTnT、GATA4、MEF2C的表达量与空白组比较无明显差异;Wnt3a联合BMP9组的Cx43、cTnT、GATA4、MEF2C基因的表达量显著高于空白组、GFP组和Wnt3a组,与单独BMP9组相比无显著性差异。结论Wnt3a不能单独诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化;Wnt3a联合BMP9可诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化。
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关 键 词: | 骨形态发生蛋白9 Wnt3a C3H10T1/2细胞 心肌细胞样细胞 |
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