不同血液透析液对U937细胞凋亡和PKCδ表达的影响

目的 研究不同血液透析液对U937细胞蛋白激酶C-δ（PKCδ）表达及细胞凋亡的影响。方法 在对数生长期人单核细胞株U937细胞培养液中添加不同血液透析液进行干预，分为A液＋B液组（血液透析液A液＋B液组合）、A液＋B液+PKCδ特异性抑制剂（rottlerin）组、A液＋B粉组（血液透析液A液＋B粉组合）、A液＋B粉+ rottlerin组，同时设立空白对照和正常对照组。分组干预后24 h和48 h分别收集细胞，Hoechst33258染色后荧光显微镜观察细胞形态学改变；Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡；RT-PCR和Western blotting 检测PKCδ mRNA和蛋白表达。结果 A液+B粉组凋亡细胞明显增多，呈凋亡典型形态学改变，分组干预24 h和48 h的细胞凋亡率分别为（34.99±3.54）%和（46.35±4.22）%，明显高于相应时间点空白对照组的（7.40±1.33）%和（7.62±0.95）%、正常对照组的（5.37±0.29）%和（6.46±1.02）%和A液＋B粉+rottlerin组的（23.58±4.12）%和（33.70±4.50）%（P<0.05）；同时与两对照组和A液＋B粉+rottlerin组比较，A液＋B粉组U937细胞PKCδ mRNA和蛋白表达均明显上调（P<0.05）。A液＋B液组细胞凋亡率及PKCδ mRNA和蛋白表达与两对照组和A液＋B液+rottlerin组比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 血液透析液A液＋B粉组合对U937细胞有明显促凋亡作用，其机制可能与上调细胞PKCδ表达有关；与A液＋B粉组合比较，选择A液＋B液组合作为血液透析液可降低患者外周血单核细胞的细胞凋亡率。

Effects of different dialysates on apoptosis and expression of PKCdelta of U937 cell line