| 小鼠神经生长因子前导肽和人内吗啡肽-2融合基因重组腺病毒载体的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 吴飞翔,俞卫锋,黄盛东,徐学武,龚德军,董刚,袁扬,孙玉明. 小鼠神经生长因子前导肽和人内吗啡肽-2融合基因重组腺病毒载体的构建与鉴定[J]. 第二军医大学学报, 2007, 28(11): 1269-1271 |
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| 作者姓名： | 吴飞翔 俞卫锋 黄盛东 徐学武 龚德军 董刚 袁扬 孙玉明 |
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| 作者单位： | 第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科,上海,200438;第二军医大学长海医院胸心外科,解放军胸心外科研究所,上海,200433 |
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| 摘 要： | ![]()
目的:制备并鉴定携带小鼠神经生长因子前导肽(PN)和人内吗啡肽-2(EM-2)融合基因的重组非增殖型腺病毒.方法:PN-EM-2目的基因经酶切插入pAxCAwt载体,构建PN-EM-2-pAxCAwt重组黏粒,脂质体转染293细胞获取重组腺病毒.PCR鉴定后扩增不含野生型病毒的阳性克隆并纯化,采用TCID50法测定病毒滴度;体外感染NIH3T3细胞观察转基因的表达,酶联免疫反应(EIA)法测定表达产物浓度.结果:融合基因序列正确,PCR可检测到401 bp的融合基因条带并排除野生病毒株,腺病毒Ad-PN-EM-2滴度为2.03×1010pfu/ml.NIH3T3细胞转染病毒后,细胞培养液内可检测到EM-2的表达,明显高于空转染及未转染细胞(P＜0.05),且随时间的延长,表达水平逐渐上升.结论:成功构建能够在非神经内分泌细胞内转基因表达成熟人EM-2的非增殖型腺病毒,为进一步将其应用于慢性疼痛的基因治疗奠定了基础.
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| 关 键 词： | 内吗啡肽-2 神经生长因子 腺病毒科 |
| 文章编号： | 0258-879X（2007）11-1269-03 |
| 修稿时间： | 2007-03-01 |
Construction and identification of recombinant adenovirus carrying fusion gene of prepropeptide of nerve growth factor and endomorphin 2 gene |
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| Abstract: | ![]()
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