Isolation of viable human pancreatic islets

This article reports a method for the isolation of viable pancreatic islets from the human pancreas. Isolated islets were obtained from human pancreata of cadavers, patients undergoing surgical operations, and fetuses, using a freehand microdissection procedure. Viability was assessed by light microscopy of sections stained with aldehyde fuchsin and by measuring the insulin output of islets in response to a glucose stimulus in vitro using a perifusion system. Ten pieces of cadaver pancreas were studied. Islets were isolated from 6 specimens and in 5 of these were shown to respond to a glucose stimulus in vitro. Histologically the islets showed minimal damage with slight degranulation of the beta cells. Five pieces of pancreas removed at operation were studied as well. Islets were isolated in all cases, but only 2 showed a response to a glucose stimulus. Pancreata from a 26-week and 34-week human fetus were also studied. It was not possible to microdissect islets from either case, but small pieces of pancreas from the 26-week fetus were shown to respond to a glucose stimulus by producing a significant increase in insulin output.

---

Résumé Cet article décrit une méthode pour isoler des ilÔts de Langérhans viables à partir de pancréas humain. Une technique de microdissection manuelle a permis d'isoler ces ilÔts à partir de pancréas humains obtenus chez des patients opérés, chez des donneurs cadavériques et chez des foetus. Leur viabilité a été établie par l'examen en microscopie optique de sections tissulaires préparés à la fuchsine aldehyde et par mesure de la sécrétion d'insuline en réponse à une stimulation au glucose au moyen d'un système de périfusion in vitro. Dix échantillons de pancréas cadavériques ont été étudiés. On a réussi à isoler des ilÔts chez six d'entre eux et cinq ont répondu au test de stimulation au glucose in vitro. à l'examen histologique, les ilÔts ne présentaient que peu de modification et une légère dégranulation des cellules bÊta. Cinq spécimens de pancréas obtenus chirurgiculement ont été étudiés. On a pu isoler des ilÔts dans tous les cas, mais seulement deux ont répondu à la stimulation au glucose. Finalement on a aussi étudié des échantillons pancréatiques obtenus chez deux foetus humains de 24 et 36 semaines respectivement. Chez ni l'un ni l'autre il n'a été possible d'isoler des ilÔts, mais de petites tranches de tissus pancréatiques préparés chez le foetus de 26 semaines et soumis au test de stimulation au glucose ont augmenté significativement leur sécrétion d'insuline.

---

---

Part of the cost of this project was defrayed by a grant from the Wellcome Trust.