| 青天葵ISSR-PCR体系优化及引物筛选 |
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| 引用本文： | 周雨晴,杜沛霖,傅鹏,谢峰,王跃峰,朱华.青天葵ISSR-PCR体系优化及引物筛选[J].中国实验方剂学杂志,2014,20(21):95-99. |
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| 作者姓名： | 周雨晴 杜沛霖 傅鹏 谢峰 王跃峰 朱华 |
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| 作者单位： | 广西中医药大学, 南宁 530001;广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室, 南宁 530007;广西中医药大学, 南宁 530001;广西中医药大学, 南宁 530001;广西中医药大学, 南宁 530001;广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室, 南宁 530007;桂林医学院, 广西 桂林 541004;广西中医药大学, 南宁 530001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(81260620);广西自然科学基金项目(2011GXNSFF018006) |
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| 摘 要： | 目的:建立适合青天葵遗传差异分析的简单重复序列区间(ISSR)-聚合酶链式(PCR)反应体系。方法:采用正交试验设计对影响青天葵ISSR-PCR反应体系的5种因素(dNTP、模板DNA、引物、Mg2+和Taq DNA聚合酶)4个水平进行优化,并结合新复极差法,对试验中各单因素进行分析。结果:确立了青天葵最佳反应体系,即在20μL的总反应体积中含有10×PCR buffer 2μL,dNTP 225μmol·L-1,Mg2+2.5 mmol·L-1,引物0.4μmol·L-1,Taq DNA聚合酶1.0 U,模板DNA60 ng;从100条引物中筛选出16条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物。结论:建立的青天葵ISSR-PCR反应体系,经过24份青天葵样品检验,得出该体系稳定可靠,可用于青天葵遗传差异分析。
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| 关 键 词： | 青天葵 简单重复序列区间 体系优化 引物筛选 |
| 收稿时间： | 2013/11/16 0:00:00 |
Optimization of ISSR-PCR Reaction System and Primers Screening in Nerviliae fordii |
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| ZHOU Yu-qing,DU Pei-lin,FU Peng,XIE Feng,WANG Yue-feng and ZHU Hua.Optimization of ISSR-PCR Reaction System and Primers Screening in Nerviliae fordii[J].China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2014,20(21):95-99. |
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| Authors: | ZHOU Yu-qing DU Pei-lin FU Peng XIE Feng WANG Yue-feng and ZHU Hua |
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| Institution: | Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530001, China;Guangxi Crop Genetic Improvement and Biotechnology Laboratory, Guangxi Academy of Agricultural Sciences, Nanning 530007, China;Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530001, China;Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530001, China;Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530001, China;Guangxi Crop Genetic Improvement and Biotechnology Laboratory, Guangxi Academy of Agricultural Sciences, Nanning 530007, China;Guilin Medical University, Guilin 541004, China;Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530001, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Nerviliae fordii inter-simple sequence repeat optimization of reaction system primers screening |
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