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p65结合肽与p65的亲和力检测及其对NF-κB DNA结合活性抑制作用的鉴定
作者姓名:徐祥  梁华平  郑江  吴强  刘东擘  史海水  胡湘南  王正国  朱佩芳
作者单位:第三军医大学,大坪医院野战外科研究所第一研究室,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042;第三军医大学,西南医院中心实验室,重庆,400038;重庆医科大学药物化学教研室,重庆,400046
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划),中国科学院资助项目,军队医学科研项目
摘    要:目的检测NF-κB p65亚基结合肽与p65间相互作用的亲和常数,以及其对NF-κB DNA结合活性的抑制效应.方法借助于生物传感器技术分析NF-κBp65亚基结合肽与p65相互作用的动力学,同时应用竞争性ELISA鉴定结合多肽对NF-κB DNA结合活性的抑制效应.结果生物传感器技术分析结果表明5条p65结合肽均能与p65发生相互作用,相互作用的亲和常数分别为GST-BPT1:2.67×10-7mol/L、GST-BPT2:9.02×10-6mol/L、GST-BPT3:1.07×10-6mol/L、GST-BPT4:8.03×10-6mol/L、GST-BPT5:9.83×10-7mol/L.竞争性ELISA检测结果表明5条p65结合肽均能在一定程度上抑制NF-κB与其顺式作用元件κB基序的结合,且这种抑制效应随多肽浓度的增加而增强.结论酵母双杂交筛选获得的5条p65结合多肽与p65间确实存在相互作用,且5条结合肽对NF-κBDNA结合活性均有一定的抑制效应,由此提示以这些多肽为先导物设计和开发靶向NF-κB的抗炎多肽药物将成为可能.

关 键 词:NF-κB  p65  生物传感器  多肽
文章编号:1000-5404(2006)07-0621-05
修稿时间:2005-04-25
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