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凋亡素基因重组腺病毒的构建
引用本文:陈健,李大江,王曙光. 凋亡素基因重组腺病毒的构建[J]. 中华消化外科杂志, 2006, 5(4): 269-273
作者姓名:陈健  李大江  王曙光
作者单位:400038,重庆,第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所、中国人民解放军西南肝胆外科医院
基金项目:重庆市科委资助项目(No.2002012)
摘    要:
目的构建携凋亡素基因的腺病毒载体,为进一步研究凋亡素基因功能及其作用机制建立基础。方法Pmel酶切线性化已经构建好的含凋亡素基因的穿梭质粒pAdTrack-CMV-VP3,然后电转化到BJ5183-AD-1细胞中进行同源重组。PacⅠ酶切出含凋亡素基因的腺病毒DNA,然后转染293细胞进行包装获得重组腺病毒,运用RT-PCR鉴定重组腺病毒。用氯化铯梯度离心纯化病毒。用物理和生物方法确定病毒的滴度。结果PacⅠ酶切证实同源重组成功。绿色荧光观察证实病毒包装成功并且具有感染力,RT-PCR证实了重组腺病毒具有凋亡素蛋白的编码。重组腺病毒的浓度为84.52×109VP/ml,滴度为6.561×109PFU/ml。结论成功构建含凋亡素基因的重组腺病毒,它的滴度足以满足体内外实验。

关 键 词:凋亡素基因  腺病毒载体  基因治疗
文章编号:1671-4555(2006)04-0269-05
修稿时间:2006-02-07

Construction of a recombinant adenovirus vector containing Apoptin gene
CHEN Jian,LI Da-jiang,WANG Shu-guang. Construction of a recombinant adenovirus vector containing Apoptin gene[J]. Chinese Journal of Digestive Surgery, 2006, 5(4): 269-273
Authors:CHEN Jian  LI Da-jiang  WANG Shu-guang
Abstract:
Keywords:Apoptin gene  Adenovirus vector  Gene therapy
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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