二元信号系统ComD/ComE与肺炎链球菌对β-内酰胺类抗生素耐药的相关性 |
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引用本文: | 樊欢,严杰,孙爱华.二元信号系统ComD/ComE与肺炎链球菌对β-内酰胺类抗生素耐药的相关性[J].中华微生物学和免疫学杂志,2010,30(11). |
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作者姓名: | 樊欢 严杰 孙爱华 |
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作者单位: | 1. 浙江大学医学院病原生物学系,杭州,310058 2. 浙江医学高等专科学校, 杭州,310053 |
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基金项目: | 卫生部科研基金资助项目 |
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摘 要: | 目的 构建肺炎链球菌comD基因敲除突变株,了解comD基因与细菌β-内酰类抗生素耐药性的相关性,探讨氯氰碘柳胺下调comD、comE和comC基因mRNA的作用.方法 构建用于comD基因敲除的自杀质粒pEVP3comD,通过同源重组及插入失活获得肺炎链球菌ATCC6306株comD基因敲除突变株comD-.采用PCR及免疫荧光法对comD-突变株进行鉴定.采用实时荧光定量RT-PCR检测氯氰碘柳胺处理前后comD-突变株及野生株comD、comE和comC基因mRNA水平变化.采用二倍琼脂稀释法测定comD-突变株及野生株对青霉素G和头孢噻肟的敏感性.结果 测序及免疫荧光试验结果证实,所构建的comD-突变株染色体DNA中comD基因被插入失活.50μmol/L或100 μmol/L的氯氰碘柳胺能明显下调comD、comE和comC基因mRNA水平(P<0.05),25μmol/L的氯氰碘柳胺则否.comD-突变株对青霉素及头孢噻肟最低抑菌浓度(MIC)值均为32μg/ml,明显高于野生株的0.06 μg/ml和1 μg/ml.结论 本研究成功地构建了肺炎链球菌comD基因敲除突变株.comD基因与细菌对β-内酰类抗生素耐药性密切相关.氯氰碘柳胺可通过下调comD、comE和comC基因的转录水平,从而对细菌感受态形成产生影响.
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关 键 词: | 肺炎链球菌 ComD/ComE二元信号传导系统 β-内酰胺类抗生素 耐药性 氯氰碘柳胺 表达调控 |
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