| 体外siRNA抑制乳腺癌细胞株端粒逆转录酶基因的表达 |
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| 引用本文： | 杨明峰,刘安定,郑专,陈建军,董学君.体外siRNA抑制乳腺癌细胞株端粒逆转录酶基因的表达[J].第四军医大学学报,2008,29(19):1761-1764. |
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| 作者姓名： | 杨明峰 刘安定 郑专 陈建军 董学君 |
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| 作者单位： | 绍兴市人民医院分子医学中心,浙江绍兴312000 |
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| 摘 要： | 目的:筛选能高效抑制乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-453端粒逆转录酶(hTERT)基因表达的RNA干扰靶点,为乳腺癌的基因治疗提供依据.方法:构建针对hTERT基因的三种siRNA(siRNA-hTERT1,siRNA-hTERT2和siRNA-hTERT3),分别转导入乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-453.同时以无同源性的siRNA-hTERT4作阴性对照,含GFP基因的载体作阳性对照.应用实时聚合酶链反应(real-time PCR)和Western Blot技术检测siRNA处理前后hTERT基因表达变化;MTT法检测细胞生长率;流式细胞术分析基因沉默对细胞凋亡的影响.结果:与阴性对照组相比,siRNA-hTERT1,siRNA-hTERT2和siRNA-hTERT3三个实验组siRNA转染细胞后,hTERT的mRNA表达量下调至21%～40%,蛋白表达下降至50%,而三个实验组间差异无统计学意义(P>0.05).转染48 h后,MCF-7细胞抑制率分别为(57±4.3)%,(61±4.3)%,(65±6.0)%;MDA-MB-453细胞抑制率分别为(45±5.1)%,(45±4.1)%,(50±4.0)%.流式细胞仪检测结果显示,细胞凋亡率有所增加,MCF-7细胞为(18.90±0.11)%,(27.30-I-0.18)%,(27.00 4-0.16)%;MDA-MB-453细胞为(12.25 4-0.17)%,(17.80±0.19)%,(20.60 4-0.21)%.结论:经siRNA-hTERTl,siRNA-hTERT2,siRNA-hTERT3处理均可明显抑制MCF-7和MDA.MB-453乳腺癌细胞的增殖及hTERT基因的表达,能够明显促进细胞的凋亡.
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| 关 键 词： | 乳腺肿瘤 端粒酶逆转录酶 RNA干扰 |
Inhibition of hTERT expression of breast cancer cell lines by siRNAs in vitro |
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| YANG Ming-Feng,LIU An-Ding,ZHENG Zhuan,CHEN Jian-Jun,DONG Xue-Jun.Inhibition of hTERT expression of breast cancer cell lines by siRNAs in vitro[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2008,29(19):1761-1764. |
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| Authors: | YANG Ming-Feng LIU An-Ding ZHENG Zhuan CHEN Jian-Jun DONG Xue-Jun |
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