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含新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶基因重组腺病素的构建及鉴定
引用本文:陈漉,金宁一,李霄,刘立明,贾鹏,刘妍,高鹏,陆蕴松,李明,迟宝荣. 含新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶基因重组腺病素的构建及鉴定[J]. 中国免疫学杂志, 2009, 25(2)
作者姓名:陈漉  金宁一  李霄  刘立明  贾鹏  刘妍  高鹏  陆蕴松  李明  迟宝荣
作者单位:1. 吉林大学第一医院消化科,长春,130021
2. 军事医学科学院解放军基因工程重点实验室,长春,130062
3. 军事医学科学院解放军基因工程重点实验室,长春,130062;吉林省人民医院血液科,长春,130021
4. 吉林大学第三医院骨科,长春,130033
5. 通化市中心医院,通化,134001
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划),吉林省科技发展计划 
摘    要:
目的:构建表达新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶(Hemagglutinin-neuramidinase,HN)基因的重组腺病毒,为进一步研究HN基因对消化道肿瘤的抑制作用及分子机制建立基础.方法:用BamHⅠ和XbaⅠ双酶切质粒pVHN,将获得的HN基因片段连接入穿梭质粒pacAd5 CMV K-N pA,构建含HN基因的穿梭质粒pacAd5-HN.利用PacⅠ单酶切对pacAd5-HN和腺病毒基因组质粒(pAd5)进行线性化处理后应用脂质体介导法共转染AAV-293细胞,分别利用蚀斑纯化和RT-PCR、Western blot等方法对重组病毒进行筛选和鉴定,并测定所获得重组病毒的滴度.结果:所构建重组病毒可有效表达HN基因,表达产物分子量约为63 kD,重组病毒滴度为108~1010 PFU/ml.结论:成功构建含HN基因的重组腺病毒,所获得重组病毒的滴度可以满足体内外实验要求.

关 键 词:HN基因  重组腺病毒  抗肿瘤

Construction and identification of the recombinant adenovirus expressing hemagglutinin-neuramidinase of Newcastle disease virus
CHEN Lu,JIN Ning-Yi,LI Xiao,LIU Li-Ming,JIA Peng,LIU Yan,GAO Peng,LU Yun-Song,LI Ming,CHI Bao-Rong. Construction and identification of the recombinant adenovirus expressing hemagglutinin-neuramidinase of Newcastle disease virus[J]. Chinese Journal of Immunology, 2009, 25(2)
Authors:CHEN Lu  JIN Ning-Yi  LI Xiao  LIU Li-Ming  JIA Peng  LIU Yan  GAO Peng  LU Yun-Song  LI Ming  CHI Bao-Rong
Abstract:
Keywords:NDV
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