长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法 |
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引用本文: | 王吉,卫礼,付瑞,李晓波,冯育芳,王淑菁,岳秉飞,贺争鸣. 长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法[J]. 中国比较医学杂志, 2013, 23(2) |
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作者姓名: | 王吉 卫礼 付瑞 李晓波 冯育芳 王淑菁 岳秉飞 贺争鸣 |
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作者单位: | 中国食品药品检定研究院,中国食品药品检定研究院,中国食品药品检定研究院,中国食品药品检定研究院,中国食品药品检定研究院,中国食品药品检定研究院,中国食品药品检定研究院,中国食品药品检定研究院 |
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基金项目: | 野生动物人工种群的生物净化及相关动物模型的建立与评价(国家科技支撑计划项目:2009BAI83B02) |
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摘 要: | 目的 建立长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物MHV的检测。方法 根据已发表的小鼠肝炎病毒(MHV)S基因序列,设计合成引物。提取MHV细胞毒RNA,以其为模板,进行PCR扩增。优化反应条件,进行特异性、敏感性、稳定性、重复性试验。并对65只长爪沙鼠及12只小鼠进行检测。结果 建立的MHV RT-PCR检测方法特异、敏感、稳定。以MHV RNA逆转录产物为模板,所能检测RNA最小模板浓度为3.1pg/μl,可检测病毒最小滴度为10-3.ml-1。65只沙鼠经RT-PCR检测,均为阴性,12只小鼠经RT-PCR检测,有3只MHV阳性,测序结果与GenBank中MHV核酸序列同源性均为97%。结论 建立的长爪沙鼠小鼠肝炎病毒(MHV)RT-PCR检测方法可用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物MHV的检测。
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关 键 词: | 小鼠肝炎病毒;反转录聚合酶链式反应;长爪沙鼠;小鼠 |
收稿时间: | 2012-12-27 |
修稿时间: | 2013-01-08 |
Development and Preliminary Application of RT-PCR Method for Determination of Mouse Hepatitis Virus in Mongolian gerbil |
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Abstract: |
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Keywords: | Mouse Hepatitis Virus RT-PCR Mongolian gerbil Mouse |
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