| 慢病毒介导SOX9基因转染骨髓间充质细胞中的基因表达 |
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| 引用本文： | 白洁玉,梁大川,程鹏,杨自权,卫小春.慢病毒介导SOX9基因转染骨髓间充质细胞中的基因表达[J].中国骨伤,2013,26(7):597-600. |
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| 作者姓名： | 白洁玉 梁大川 程鹏 杨自权 卫小春 |
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| 作者单位： | 山西医科大学第二医院骨科,山西太原,030001 |
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| 基金项目： | 国际科技合作项目(编号:2010DFA32450);国家自然科学基金资助项目(编号:30973048);国家人事部及山西省人事厅留学回国人员科技活动择优资助项目;山西省留学基金项目(编号:107);山西省自然科学基金资助项目(编号:2010011050-6) |
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| 摘 要： | 目的:构建携带小鼠SOX9基因的慢病毒载体,体外转染小鼠骨髓间充质细胞,观察小鼠SOX9基因在小鼠间充质细胞中的表达。方法:从含有小鼠SOX9基因的质粒提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增目的基因。连接目的基因与经Age-Ⅰ酶切线性化的慢病毒载体,转化感受态的大肠杆菌对质粒进行扩增,筛出阳性转化子,经293T细胞包装,收集病毒后,通过基因测序和限制性核酸内切酶酶切的方法对质粒进行鉴定。Lenti-SOX9-EGFP体外转染小鼠骨髓间充质细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染是否成功,并通过流式细胞仪测定转染效率。同时利用RT-PCR和Western Blot检测小鼠SOX9基因的表达。结果:成功构建了携带SOX9基因慢病毒载体,Lenti-SOX9-EGFP能高效转染小鼠骨髓间充质细胞。RT-PCR和Western Blot检测显示经SOX9基因转染的小鼠骨髓间充质细胞表达目的基因产物。结论:利用慢病毒介导SOX9基因成功地转染小鼠骨髓间充质细胞,而且SOX9基因在小鼠骨髓间充质细胞中得到表达,这为SOX9修复软骨损伤的进一步研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 骨关节炎 细胞介导免疫 慢病毒属 SOX9基因 骨髓间充质细胞 |
| 收稿时间： | 2012/8/25 0:00:00 |
Gene expression of bone mesenchymal stem cells transduced by the lentiviral vector of SOX9 gene |
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| BAI Jie-yu,LIANG Da-chuan,CHENG Peng,YANG Zi-quan and WEI Xiao-chun.Gene expression of bone mesenchymal stem cells transduced by the lentiviral vector of SOX9 gene[J].China Journal of Orthopaedics and Traumatology,2013,26(7):597-600. |
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| Authors: | BAI Jie-yu LIANG Da-chuan CHENG Peng YANG Zi-quan and WEI Xiao-chun |
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| Institution: | Department of Orthopaedics, the Second Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi, China;Department of Orthopaedics, the Second Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi, China;Department of Orthopaedics, the Second Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi, China;Department of Orthopaedics, the Second Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi, China;Department of Orthopaedics, the Second Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Osteoarthritis Cell-mediated immunity Lentivirus SOX9 gene Bone mesenchymal stem cells |
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