| 野生型和突变型人白介素13哺乳细胞表达质粒的构建 |
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| 引用本文： | 储毅,刘全华,华丽,朱亚菊,高苗苗,鲍一笑. 野生型和突变型人白介素13哺乳细胞表达质粒的构建[J]. 中国免疫学杂志, 2011, 27(11): 966-969. DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.11.002 |
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| 作者姓名： | 储毅 刘全华 华丽 朱亚菊 高苗苗 鲍一笑 |
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| 作者单位： | 上海交通大学医学院附属新华医院儿童呼吸科,上海,200092 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目资助，上海市科学技术委员会科研计划项目资助 |
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| 摘 要： | ![]()
目的:构建野生型及突变型人IL-13(hIL-13)哺乳细胞表达质粒。方法:采用融合PCR扩增人生长激素(hGH)-hIL13融合蛋白编码序列。PCR产物和pcDNA3.1表达载体经HindⅢ和EcoRⅠ双酶切处理后,将PCR产物定向插入pcDNA3.1真核表达载体中,构建质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g。将其转化到DH5α感受态细胞内进行扩增,阳性克隆鉴定,质粒抽提,进行测序验证。结果:重组质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g经测序验证,hGH-hIL13融合蛋白编码序列与实验设计一致,且已与pcDNA3.1(+)真核表达载体正确重组。结论:成功构建了哺乳细胞表达质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g,为后续野生型及突变型hIL-13哺乳细胞的重组表达奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人白介素13 表达质粒 构建 哺乳细胞 |
Construction of the wild-type and mutant interleukin-13 expression plasmids in mammalian cells |
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| CHU Yi,LIU Quan-Hua,HUA Li,ZHU Ya-Ju,GAO Miao-Miao,BAO Yi-Xiao. Construction of the wild-type and mutant interleukin-13 expression plasmids in mammalian cells[J]. Chinese Journal of Immunology, 2011, 27(11): 966-969. DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.11.002 |
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| Authors: | CHU Yi LIU Quan-Hua HUA Li ZHU Ya-Ju GAO Miao-Miao BAO Yi-Xiao |
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| Affiliation: | CHU Yi,LIU Quan-Hua,HUA Li,ZHU Ya-Ju,GAO Miao-Miao,BAO Yi-Xiao.Department of Respiratory Medicine,Xinhua Hospital Affiliated to Shanghai Jiaotong University School of Medicine,Shanghai 200092,China |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | hIL-13 Expression plasmid Construction Mammalian cell |
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