| 摘 要： | 目的探讨靶向survivin基因反义寡核苷酸(as ON)对MCF-7人乳腺癌细胞系凋亡及药物敏感性等生物学行为的影响。方法 MCF-7人乳腺癌细胞株分为正常组、脂质体组、正义组和反义组,正常组常规培养,并用Opti-MEM培养液代替转染液进行转染;脂质体组采用Lipofectamine 2000-Opti-MEM代替转染液进行转染;正义组采用survivin正义寡核苷酸进行转染;反义组采用survivin基因as ON转染。采用反转录聚合酶链反应检测各组survivin mRNA表达水平,四甲基偶氮唑盐法检测细胞抑制率;分别用紫杉醇处理MCF-7细胞株,并检测紫杉醇处理后survivin mRNA表达水平和细胞抑制率。结果 as ON转染后,MCF-7细胞中survivin mRNA表达水平显著降低,其中反义组survivin mRNA表达水平显著低于正常组、脂质体组和正义组(0.34±0.10比0.63±0.10、0.74±0.20、0.73±0.10),细胞抑制率显著高于正常组、脂质体组和正义组[(51.32±7.42)%比(3.72±0.10)%、(4.12±0.10)%、(4.53±0.10)%],差异有统计学意义(P<0.05)。转染后反义组细胞周期被阻滞于G2/M期;其中反义组G2/M期细胞比率显著高于正常组、脂质体组和正义组[(34.9±2.7)%比(21.5±2.8)%、(19.4±2.6)%、(18.8±1.9)%],反义组细胞凋亡率亦显著高于正常组、脂质体组和正义组[(16.3±1.2)%比(5.1±0.4)%、(5.3±0.5)%、(5.7±0.5)%],差异有统计学意义(P<0.05)。各组经紫杉醇处理后survivin mRNA表达水平和细胞抑制率均显著增加,与不加药组比较差异有统计学意义(P<0.05);其中反义组survivin mRNA表达水平显著低于正常组、脂质体组和正义组(0.62±0.15比1.37±0.33、1.47±0.33、1.33±0.26),细胞抑制率显著高于正常组、脂质体组和正义组[(84.75±9.62)%比(36.44±3.73)%、(41.45±5.36)%、(40.82±4.93)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论 survivin基因与MCF-7细胞增殖、抗凋亡、化疗耐药等生物学行为有关,通过as ON下调survivin基因的表达水平,能够促进肿瘤细胞凋亡和增强对化疗药物的敏感性,提示survivin基因是乳腺癌基因治疗的主要靶点之一。
|
