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结核分枝杆菌Ag85A真核表达质粒的构建与鉴定
引用本文:张帆,赵晔,钟森,史小玲,陈枫,张建军. 结核分枝杆菌Ag85A真核表达质粒的构建与鉴定[J]. 泸州医学院学报, 2003, 26(3): 203-206
作者姓名:张帆  赵晔  钟森  史小玲  陈枫  张建军
作者单位:1. 泸州医学院附属医院感染科,四川泸州,646000
2. 温州医学院附属一院感染科
基金项目:国家自然基金资助项目(编号:39870 70 3)
摘    要:
目的:构建结核分枝杆菌Ag85A重组真核表达质粒,为DNA疫苗的研究提供靶基因。方法:采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出结核杆菌Ag85A分泌性蛋白的基因,应用T-A克隆技术,直接与pUCan-T载体连接,转化大肠杆菌JMl09(E.coli JMl09),蓝白筛选,阳性克隆经酶切鉴定和DNA测序证实基因碱基无误后,用NheⅠ和XbaⅠ双酶消化,回收的小片段与用NheⅠ和XbaⅠ消化的真核表达质粒pCI-neo连接,转化E.coli JMl09,筛选阳性克隆酶切鉴定。结果:经酶切鉴定,证实结核分枝杆菌重组真核表达质粒pCI-Ag85A构建正确。结论:结核分枝杆菌真核表达质粒pCI-Ag85A构建成功,为进一步研究其作为一种结核病DNA密菌在预防和治疗结核病中的作用奠定了基础。

关 键 词:结核杆菌 抗原85 pCI-neo 克隆
文章编号:1000-2669(2003)03-0203-04
修稿时间:2002-10-24

CONSTRUCTION OF A EUKARYOTIC EXPRESSION VECTOR OF MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS AG85A
Zhang Fan,et al. CONSTRUCTION OF A EUKARYOTIC EXPRESSION VECTOR OF MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS AG85A[J]. Journal of Luzhou Medical College, 2003, 26(3): 203-206
Authors:Zhang Fan  et al
Affiliation:Zhang Fan,et al Department of Infection and Immunity,Luzhou Medical College Hospital
Abstract:
Keywords:Mycobacterium tuberculosis  Ag85A  Cloning  pCI-Neo
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