微RNA-9对胃癌细胞内CDX2基因表达的影响

目的探讨改变胃癌细胞中微RNA-9(miRNA-9)的表达水平对尾型同源核转录因子2(CDX2)表达的影响。方法采用生物信息学预测调控CDX2的目的 miRNA。采用脂质体法将miRNA-9类似物、miRNA-9抑制物和无关序列质粒瞬时转染胃癌细胞株AGS、MKN45,以无关序列作为阴性对照。将细胞分为miRNA-9类似物组、miRNA-9抑制物组、阴性对照组、空白对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miRNA-9和CDX2mRNA的表达水平,采用免疫印迹实验(Western blot)检测CDX2蛋白表达。结果 CDX2mRNA 3′UTR和miRNA-9有高度保守的结合靶点。与空白对照组、阴性对照组相比,miRNA-9类似物组细胞中的CDX2蛋白表达显著降低,miRNA-9抑制物组的CDX2蛋白表达显著上调,而CDX2mRNA表达未发生显著变化。结论在胃癌细胞株AGS、MKN45中,miRNA-9具有抑制CDX2蛋白表达的作用,而对CDX2mRNA表达无影响。抑制miRNA-9表达后,CDX2蛋白表达明显上调。