利用激光扫描共聚焦显微镜测定APA微囊通透性

目的：海藻酸钠多聚赖氨酸海藻酸钠（ＡＰＡ）微囊能够成功地延长同种或异种移植组织或细胞的存活时间，而微囊膜的通透性是决定囊内细胞存活和微囊免疫隔离效果的关键因素。本实验用激光扫描共聚焦显微镜（ＬＳＣＭ）以测定ＡＰＡ微囊膜的通透性。方法：采用ＦＩＴＣ标记的不同分子量的葡聚糖（ＦＤ）和ＩｇＧ与微囊共孵育，观察形成的激光共聚焦图像。结果：平均分子量为７１和１６７ｋＤａ的ＦＤ及分子量为１５０ｋＤａ的ＩｇＧ均不能扩散进入微囊内，而平均分子量为１２和２０ｋＤａ的ＦＤ则可自由扩散进微囊内，平均分子量为４０ｋＤａ的ＦＤ可部分扩散进微囊内。提示微囊膜的截割分子量在４０～７１ｋＤａ之间。利用ＬＳＣＭ的时间扫描功能可动态观察ＦＤ１２向单个微囊内的扩散情况，表明较小直径微囊内ＦＤ１２增加的速度明显快于直径较大的微囊。包囊细胞和含血清的培养液对微囊膜的分子截割范围和ＦＤ１２向微囊内的扩散速度无明显影响。结论：我们制备的ＡＰＡ微囊既可允许小分子的营养物通过，以满足微囊内细胞的生存需要，又能截割７１ｋＤａ以上的大分子物质，起到免疫隔离作用。利用ＬＳＣＭ技术可简便易行地测定微囊通透性

Determination of the permeability of APA microcapsules by laser scanning confocal microscopy