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大鼠法尼酯X受体慢病毒构建及鉴定
作者姓名:牛永东,  陈理明,  吴曼鹏,  程訸,  张艳美,  黄展勤,  石刚刚
作者单位:[1]汕头大学医学院药理学教研室,广东汕头515041; [2]汕头大学医学院第一附属医院肿瘤科,广东汕头515041; [3]汕头市第二人民医院儿科,广东汕头515011
基金项目:广东省自然科学基金资助项目(S2012010010955); 中国博士后科学基金资助项目(2012M510200); 广东省医学科研基金资助项目(A2013656); 上海市肿瘤研究所“癌基因及相关基因国家重点实验室”开放课题(90-14-03); 中央财政支持地方高校发展专项资金
摘    要:
目的:构建大鼠法尼酯X受体(rFXR)慢病毒,为研究FXR在原发性肝细胞癌中的分子机制奠定基础。方法:以pCMX-rFXR(NM_021745.1)为模板,将rFXR克隆到pWPXL表达载体中,酶切及DNA测序鉴定后转染HEK293T细胞,包装重组慢病毒rFXR sh-RNA。Western blot鉴定后,感染Huh7细胞进行功能检测。结果:证实pWPXL-rFXR sh-RNA构建及病毒包装成功;感染Huh7后,rFXR表达明显提高:FXR靶基因SHP和BSEP的表达增加。结论:pWPXL-rFXR sh-RNA慢病毒构建及包装成功,为研究FXR的生物学功能奠定基础。

关 键 词:法尼酯X受体  慢病毒  原发性肝细胞癌
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