MS-302三道测量分析系统的应用及HI-6在离体膈神经-膈肌上抗梭曼的作用机制

目的 呼吸肌麻痹是有机磷酸酯类化合物严重中毒致死的主要原因之一，由于膈肌是最主要的呼吸肌，因此，建立一种精确灵敏的实验方法评价药物对离体膈神经 膈肌的影响, 探讨相应的抗呼吸肌麻痹药物的实验显得尤为重要。本文在MS-302三道测量分析系统上探讨了抗神经毒有效化合物HI-6在离体膈神经-膈肌上抗梭曼的作用机制。方法 采用MS-302三道测量分析系统，观察大鼠离体膈神经-膈肌的收缩功能,此方法较既往测量方法实时、高效而灵敏。观察膈肌收缩功能的同时，待标本稳定30 min后取膈肌置-20℃冰箱，留待测定正常乙酰胆碱酯酶(AChE)活性，然后向麦氏槽中加入以台式液配置的药物，加入药液量一般不超过0.5 ml，使药物浓度为10 μmol·L^-1～1 mmol·L^-1, 对照组加入等量的生理盐水, 于加药后不同时间点留取膈肌样品测定AChE活性，观察药物对膈肌AChE活性的直接影响。结果 ① MS-302三道测量分析系统上，对膈神经-膈肌标本强直收缩曲线下的面积进行测量，能较为直接的反映膈神经-膈肌标本的生理功能，且结果精确。② HI-6 10和100 μmol·L^-1对正常膈神经-膈肌收缩功能影响不明显，当药物浓度为1 mmol·L^-1时, HI-6对正常膈神经-膈肌收缩功能有抑制作用；HI-6 10 μmol·L^-1对梭曼抑制的标本收缩功能既没有保护作用也没有拮抗作用; HI-6 100 μmol·L^-1有一定的保护和拮抗作用；当剂量增加到1 mmol·L^-1时，HI-6的保护作用和拮抗作用都明显增强，且保护作用在30 min内最佳。③ 预先给予HI-6不能减弱梭曼对大鼠离体膈肌AChE的抑制，提示HI-6对梭曼抑制的大鼠离体膈肌AChE无明显保护作用；梭曼中毒后给予HI-6对梭曼抑制的膈肌AChE活性无显著影响，提示HI-6对梭曼抑制的膈肌AchE无明显重活化作用。结论 HI-6对梭曼抑制的离体膈神经-膈肌收缩功能的恢复可能是直接生理对抗作用,在本实验条件下未见膈肌AChE活力有明显的恢复。