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p53对体外神经干细胞增殖能力的影响
引用本文:蒋蓉,杨娜,李睿,陆利. p53对体外神经干细胞增殖能力的影响[J]. 神经解剖学杂志, 2016, 0(5): 618-622. DOI: 10.16557/j.cnki.1000-7547.2016.05.0012
作者姓名:蒋蓉  杨娜  李睿  陆利
作者单位:1. 山西医科大学人体解剖学教研室,太原,030001;2. 山西医科大学第一临床医学院,太原,030001
基金项目:国家自然科学基金(81571381);山西省自然科学基金(2015011132);国家级大学生创新创业训练项目(201510114005)
摘    要:
目的:探讨p53对神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖能力的影响,寻求维持NSCs活力的有效途径。方法:分离出生后0 d(postnatal day 0,P0)和生后90 d(postnatal day 90,P90)小鼠前脑室管膜下区(subventricular zone,SVZ)组织,培养NSCs。比较P0和P90 NSCs增殖能力并通过q PCR和Western Blot检测衰老相关分子p53和p21在新生和成年NSCs的表达变化。应用p53抑制剂PFT-α(20μmol/L)连续作用于P90 NSCs 72 h,通过Brd U掺入实验和CCK-8实验,分析抑制p53对NSCs增殖能力的影响。结果:随年龄增加,NSCs的增殖能力降低,P90组神经球的数量和直径分别是P0组的22.9%±1.2%(P0.01)和63.5%±3.7%(P0.05)。P90NSCs p53和p21 mRNA表达水平分别较P0 NSCs显著增高了1.4±0.05和1.2±0.04(P0.01)。Western Blot结果证明P90 NSCs p53蛋白的表达水平比P0 NSCs增加了1.2±0.01倍(P0.05)。经p53抑制剂PFT-α连续处理P90 NSCs 72 h后,CCK-8结果显示PFT-α组吸光度值1.1±0.02高于DMSO组0.8±0.03(P0.05),Brd U掺入实验也显示PFT-α组Brd U阳性细胞率为43.3%±4.0%显著高于DMSO组24.8%±3.1%(P0.05)。结论:p53信号通路激活可能是导致成年小鼠NSCs增殖能力下降的重要因素,应用p53抑制剂PFT-α能够增加成年NSCs的增殖能力。

关 键 词:神经干细胞  p53  细胞增殖  小鼠

Effects of p53 on proliferation of neural stem cells in vitro
Abstract:
Keywords:neural stem cells  p53  cell proliferation  mouse
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