足细胞表达有功能的代谢型谷氨酸受体1和5

目的 研究足细胞是否表达有功能的代谢型谷氨酸受体（mGluR）。 方法 以RT-PCR法检测基因表达,Western印迹、免疫荧光双染色和免疫电镜检测蛋白质表达。酶免疫实验（EIA）、电泳迁移位移实验（EMSA）和Western印迹法检测细胞环腺苷酸（cAMP）的产生和转录因子cAMP反应元件结合蛋白（CREB）的活化。激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙的变化。 结果 足细胞表达mGluR1和5的基因和蛋白质,肾小球中mGluR1的表达和足细胞标志蛋白synaptopodin表达共定位。免疫电镜显示mGluR1位于足细胞体和足突细胞膜下层。mGluR1和5的激动剂3,5-二羟基苯甘氨酸（DHPG）诱导足细胞快速地产生cAMP,转录因子CREB被激活,磷酸化CREB表达增高。这些改变能被mGluR1和5的选择性抑制剂1-氨基茚-1,5-二羧酸（AIDA）以及腺苷酸环化酶抑制剂（SQ22536）抑制,而2-氨基乙氧化联苯-甲硼烷（2APB）则不具有上述抑制作用。DHPG诱导足细胞内游离钙缓慢持续地增加,细胞孵育于不含钙的培养液中、AIDA预处理以及2APB预处理抑制了DHPG诱导的细胞内游离钙离子增加。 结论 足细胞表达有功能的mGluR1和5。