| 摘 要： | [目的] 探索宽胸气雾剂(Kuanxiong aerosol,KXA)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心肌梗死(myocardial infarction,MI)大鼠心肌炎症和细胞焦亡的影响,并分析其对焦亡关键通路Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子(myeloid differentiation primary response gene 88,MyD88)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain containing 3,NLRP3)/胱天蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,caspase-1)的作用。[方法] 按体质量将30只雄性Wistar大鼠随机分为5组:对照组(0.9%氯化钠溶液)、模型组(ISO 120 mg·kg-1)、单硝酸异山梨酯组(ISO 120 mg·kg-1＋单硝酸异山梨酯5 mg/kg·d)、KXA低剂量组(ISO 120 mg·kg-1＋KXA 0.1 mL/kg·d)和KXA高剂量组(ISO 120 mg·kg-1＋KXA 0.3 mL/kg·d),每组6只,连续灌胃14 d,并在第13、14天腹腔注射ISO。末次干预结束后,麻醉采血、分离心脏,以酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组血清肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)和心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)水平,以及血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色检测心肌病理变化;转录组测序分析各组心肌基因表达差异;免疫印迹检测焦亡通路相关蛋白的表达情况。[结果] 与对照组比较,模型组cTnT和CK-MB检测显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01),表明MI大鼠模型构建成功。HE染色显示,KXA和单硝酸异山梨酯干预后心肌纤维排列断裂、紊乱情况明显减轻。转录组测序显示,对照组和模型组之间存在2 646个差异基因;模型组和KXA组之间存在714个差异基因,进一步分析发现130个基因表达上调,7个基因表达下调,其中炎症相关性通路TLR4通路被显著富集。与模型组比较,KXA高剂量组、KXA低剂量组和单硝酸异山梨酯组血清IL-6、IL-18、IL-1β和TNF-α表达显著减少,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。免疫印迹显示,模型组TLR4、MyD88、磷酸化核因子-κB p65(phospho-nuclear factor-κB,p-NF-κB )p65、NLRP3、切割的胱天蛋白酶-1(cleaved caspase-1)和消皮素D蛋白N端结构域(Gasdermin D-N,GSDMD-N)表达显著高于对照组;而KXA高剂量组、KXA低剂量组和单硝酸异山梨酯组的表达显著低于模型组(P<0.05,P<0.01)。[结论] KXA可以改善心肌缺血,减轻心脏损伤,抑制心肌细胞焦亡和炎症反应,其机制可能与调节TLR4/MyD88/NLRP3/caspase-1信号通路有关。
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