hsp90α基因在染色质模板上的热诱导转录 |
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作者姓名: | Li ZY Dai H Yang J Zhang Y Wu NH Shen YF |
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作者单位: | 中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005 |
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摘 要: | 目的在体外将带有hsp90α基因启动子的报告基因质粒pBLCAT3α1组装为染色质模板,用于研究hsp90α基因的热诱导转录.方法采用竞争性RT-PCR定量检测基因启动子活性的方法,研究染色质模板的体外组装,并比较染色质模板与裸露DNA模板上基因的转录活性.结果优化了热休克处理的HeLa全细胞抽提物在基因转录活性研究中的实验条件:用体外重组表达的染色质组装相关因子与核心组蛋白在体外与hsp90α基因启动子质粒组装成染色质;证明染色质模板的hsp90α基因体外转录水平低于裸露DNA模板,而其热诱导效率显著高于对照组.结论在体外组装的染色质模板具有阻遏hsp90α基因转录的活性,但明显提高了该基因的热诱导表达效率.
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关 键 词: | 全细胞抽提物 体外转录 染色质组装 |
修稿时间: | 2004年3月5日 |
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