| 摘 要： | ![]()
目的建立双抗体夹心酶联免疫吸附试验(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay, DAS-ELISA)检测呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)滴度。方法以RSV融合前F蛋白的两种抗体AM14与D25作为捕获抗体和检测抗体, 通过对其抗体浓度的优化来确定DAS-ELISA较适反应条件, 并对该方法的特异性、重复性、灵敏度及适用性进行验证。结果选择用AM14抗体作为捕获抗体, D25作为检测抗体。捕获抗体AM14较适工作浓度为20 μg/mL, 检测抗体D25的稀释比例为1∶3 000。建立的DAS-ELISA与轮状病毒(rotavirus, RV)和人3型副流感病毒(human parainfluenza virus type 3, HPIV-3)无交叉反应, 且不同稀释倍数的RSV病毒进行批内与批间重复试验的变异系数(coefficient of variation, CV)均<10%;不同亚型的RSV及蛋白进行试验, 均能检测到病毒滴度;检测结果与CCID50...
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