异种移植动物模型-转入CD59 cDNA首建小鼠的培育 |
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引用本文: | 王磊,李志伟,张同琳,林爱星,陈永福. 异种移植动物模型-转入CD59 cDNA首建小鼠的培育[J]. 徐州医学院学报, 2003, 23(1): 1-4 |
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作者姓名: | 王磊 李志伟 张同琳 林爱星 陈永福 |
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作者单位: | 1. 徐州市第一人民医院普外科,江苏,徐州,221002 2. 北京大学第三医院普外科,北京,100085 3. 中国农业大学生物技术国家重点实验室,北京,100000 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助课题(39770764) |
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摘 要: | ![]() 目的:培育转人CD59cDNA首建小鼠,以进一步研究异种移植,并为建立鼠系奠定基础。方法:构建转基因结构pEGF-C1-OMT-CD59,限制性内切酶切除质粒载体,回收、纯化包括人CD59cDNA、绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因及各自动启动子的约3.3kb的基因片段,用显微注射法将此片段注人小鼠受精卵,提取F0低小鼠尾组织DNA,用PCR法初选,再用Southern杂交对PCR阳性鼠进一步筛选,确定阳性转基因首建小鼠。结果:共注射590枚受精卵,移植于24只受体母鼠中,出生F0代小鼠73只;PCR初选有8只呈阳性(6♂:2♀),Southern杂交有2只呈阳性(1♂:1♀);经粗略估算,整合外源基因拷贝数分别为3和10。结论:成功地培育出转人CD59cDNA首建小鼠,用PCR和Southern杂交法证实了外源片段的整合。
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关 键 词: | 异种移植 CD59蛋白 转基因小鼠 |
文章编号: | 1000-2065(2003)01-0001-04 |
修稿时间: | 2002-10-17 |
Production of human CD59 cDNA transgenic founder mice--an animal model for xenotransplantation |
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Abstract: | ![]()
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Keywords: | |
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