基于mTOR/Beclin1通路探讨血竭散对克罗恩病大鼠结肠组织自噬和炎症小体的影响

目的 研究血竭散对克罗恩病大鼠结肠组织自噬和炎症小体的影响，探讨其治疗克罗恩病的作用机制。方法 采用2，4，6-三硝基苯磺酸诱导复制克罗恩病大鼠模型。模型复制后，将36只大鼠随机分为空白组，模型组，血竭散低、中、高剂量组和柳氮磺砒啶（sulfasalazine，SASP）组，每组6只。苏木精-伊红染色法观察大鼠结肠组织病理学改变，酶联免疫吸附法检测结肠组织中炎症细胞因子表达水平，实时荧光定量PCR法检测Beclin1、NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3（NOD-like receptor family pyrin domain containing 3，NLRP3）和黑素瘤缺乏因子2（absent in melanoma 2， AIM2）mRNA表达水平，蛋白免疫印迹法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）、p-mTOR、Beclin1、NLRP3、AIM2、含Caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a Caspase recruitment domain,ASC)和Caspase-1蛋白表达水平，免疫荧光法检测微管相关蛋白轻链3β(microtubule-associated protein light chain 3 beta,LC3B)表达水平。结果 与模型组比较，血竭散和SASP干预后大鼠结肠组织病理学评分，白细胞介素-1β（interleukin-1 beta， IL-1β）、白细胞介素-18（interleukin-18，IL-18）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha， TNF-α）表达水平显著降低（P<0.05）。与空白组比较，模型组大鼠结肠组织中p-mTOR表达水平显著降低，Beclin1、LC3B、NLRP3、AIM2、ASC和Caspase-1表达水平显著增加（P<0.05）。血竭散和SASP干预能上调p-mTOR表达水平，下调Beclin1、LC3B、NLRP3、AIM2、ASC和Caspase-1表达水平（P<0.05）。结论 血竭散可能通过调控mTOR/Beclin1信号通路抑制肠细胞自噬，减少炎症小体活化，改善克罗恩病大鼠结肠炎。

Effect of Xuejie Powder on Autophagy and Inflammasomes in Colon Tissue of Rats with Crohn's Disease Based on the mTOR/Beclin1 Pathway