| 酸敏感离子通道1a在酸诱导的大鼠关节软骨细胞自噬的作用及其机制研究 |
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| 引用本文： | 张晨晨,唐杰,胡伟,葛金芳,林梅英,陈飞虎. 酸敏感离子通道1a在酸诱导的大鼠关节软骨细胞自噬的作用及其机制研究[J]. 中国药理学通报, 2013, 29(8) |
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| 作者姓名： | 张晨晨 唐杰 胡伟 葛金芳 林梅英 陈飞虎 |
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| 作者单位： | 1. 安徽医科大学药学院,安徽,合肥,230032
2. 安徽医科大学第二附属医院药剂科,安徽合肥,230601 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，高等学校博士学科点专项科研基金项目 |
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| 摘 要： | 目的研究酸敏感离子通道1a(acid-sensing ion chan-nel 1a)在体外培养的酸诱导的大鼠关节软骨细胞自噬的作用及其可能机制。方法Ⅱ型胶原酶消化法分离大鼠关节软骨细胞,鉴定后传代培养,观察在不同pH条件下诱导的细胞自噬情况以确定胞外酸化条件;将软骨细胞分为pH7.4环境下培养的正常组、pH 6.0的酸化组、以及经ASIC1a非特异性阻断剂Amiloride和特异性阻断剂PcTX1处理的酸化组,RT-PCR法检测细胞自噬基因Beclin-1 mRNA的表达,Western blot法检测自噬蛋白LC3及ERK1/2、p38MAPK磷酸化蛋白的表达,透射电子显微镜法(TEM)观察自噬小体数量的变化;通过使用ERK1/2、p38MAPK磷酸化抑制剂(PD98059、SB203580),采用RT-PCR和Western blot法观察ERK1/2及p38MAPK对酸诱导的软骨细胞自噬的影响。结果 pH 5.5和pH 6.0胞外酸化刺激均能明显升高软骨细胞自噬水平(P<0.01);与pH 7.4组比较,酸化组软骨细胞Beclin-1 mRNA及LC3、磷酸化的ERK1/2和p38MAPK蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),且自噬小体数量增多,ASIC1a阻断剂组自噬水平及ERK1/2、p38磷酸化蛋白表达水平较酸化组明显降低(P<0.01),且自噬体数量减少;与pH 6.0组相比,ERK1/2磷酸化抑制剂处理后,Beclin-1 mR-NA和LC3蛋白的表达均下调(P<0.05,P<0.01),而p38磷酸化抑制剂组自噬水平则无明显变化。结论胞外酸化环境下能诱发软骨细胞自噬,阻断ASIC1a能明显减弱酸化诱导的软骨细胞自噬,其机制可能与抑制ERK1/2磷酸化有关。
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| 关 键 词： | 酸敏感离子通道1a 胞外酸化 自噬 关节软骨细胞 LC3 ERK1/2 |
Effects of acid-sensing ion channel 1a on acid-induced autophagy of articular chondrocytes and its possible mechanisms |
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| ZHANG Chen-chen , TANG Jie , HU Wei , GE Jin-fang , LIN Mei-ying , CHEN Fei-hu. Effects of acid-sensing ion channel 1a on acid-induced autophagy of articular chondrocytes and its possible mechanisms[J]. Chinese Pharmacological Bulletin, 2013, 29(8) |
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| Authors: | ZHANG Chen-chen TANG Jie HU Wei GE Jin-fang LIN Mei-ying CHEN Fei-hu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | acid-sensing ion channel 1a extracellular acidification autophagy chondrocytes LC3 ERK1/2 |
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