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重组抗HBsAg单链抗体在HBV转基因小鼠体内作用的研究
引用本文:熊盛,王一飞,邢少膊,邓宁,张美英,陈文吟,饶桂荣,粟宽源,余宙耀.重组抗HBsAg单链抗体在HBV转基因小鼠体内作用的研究[J].中华微生物学和免疫学杂志,2004,24(5):356-359.
作者姓名:熊盛  王一飞  邢少膊  邓宁  张美英  陈文吟  饶桂荣  粟宽源  余宙耀
作者单位:1. 暨南大学生物医药研究开发基地
2. 解放军458医院全军传染病中心
基金项目:国家自然科学基金 (No.3 0 3 71661),广东省自然科学基金团队项目 (No .2 0 0 3 11),广州市科技局重大攻关项目 (No .99 2 0 10 0 1)基金资助
摘    要:目的 研究重组人源抗HBsAg单链抗体 (HBscFv)在HBV转基因小鼠体内的活性作用 ,探讨HBV转基因小鼠作为HBsAg特异性抗体的结合活性评价模型的可行性。方法 工程菌表达的HBscFv包涵体经固定化金属螯合层析和分子排阻层析两步纯化后 ,分步透析复性。复性后的HBscFv(0 .9g L)经尾静脉注射HBV转基因小鼠 ,一定时间后测定鼠血清中HBsAg的浓度 ,计算抗体注射前后HBsAg浓度下降的百分比 (结合率 ) ,同时以人血源HBsAbIgG(40U ml)和生理盐水作为对照。结果 两步纯化获得纯度达到 98%的重组HBscFv。HBscFv制品能够结合转基因小鼠体内的HBsAg,其结合率为 (30 .4 7± 9.85 ) % ,与生理盐水组差异有显著性 (P <0 .0 0 1) ,与HBsAbIgG组差异无显著性(P >0 .0 5 ) ;对照品HBsAbIgG的结合率为 (39.0 0± 7.4 3) % ,与生理盐水组差异也有显著性 (P <0 .0 0 1)。比较HBscFv和HBsAbIgG的结合率及其浓度 ,求得HBscFv的结合效价为 31.5 8U mg。结论 HBscFv在转基因小鼠体内具有特异性结合HBsAg活性 ,HBV转基因小鼠可发展为评价HBsAg特异性抗体的体内结合活性的候选模型。

关 键 词:转基因小鼠  乙肝病毒  单链抗体  结合活性  体内
修稿时间:2003年8月25日

In vivo binding activity of recombinant ScFv against HBsAg in HBV transgenic mice
Abstract:
Keywords:Transgenic mouse  Hepatitis B virus  Single-chain Fv  Binding activity  In vivo
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