用重叠延伸PCR技术纠正人工合成乙型肝炎病毒核心抗原基因中的突变

目的：利用重叠延伸PCR技术纠正人工合成乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）基因中的突变碱基。方法：针对构建的重组质粒PGEM-7Z／HBcAg中的两处突变设计三对引物，PCR定点突变后对重新构建的PGEM-7Z／HBcAg进行菌落PCR和酶切鉴定，初步筛选的阳性克隆进一步通过序列分析进行确证。结果：经PCR定点突变后，测序证明HBcAg基因序列与设计完全一致。结论：用该方法成功纠正了人工合成的乙肝病毒核心抗原基因中两个碱基的缺失，获得了预期的目的基因。